第一部分河北省乳腺癌HER2检测及判读现状调查分析目的:了解2019版HER2判读新共识颁布后河北省乳腺癌HER2检测及判读现状,发现潜在问题,提高检测及判读水平和结果的可重复性。方法:1.使用网络问卷对以河北省为主的多家医院乳腺癌HER2检测及判读问题进行调查,病理医师还可提出开放性问题,通过重申指南内容及参考相关研究文献,对HER2实际检测及判读过程的具体问题进行解答。多因素Logistic回归分析影响HER2阳性率的主要因素。2.来自多家医院的35位病理医生对50例浸润性乳腺癌的HER2进行线上判读,Kappa检验分析判读结果的一致性。结果:1.多因素Logistic回归分析显示影响HER2阳性率的主要因素为标本从离体到固定的时间（χ2=36.662,P=0.013）、免疫组化方法（χ2=26.207,P=0.003）和HER2抗体的选择（χ2=32.755,P=0.036）。2.HER2检测的应用现状较理想:96.4%（163/169）的单位乳腺癌术前穿刺和术后标本常规做HER2检测,治疗过程中出现复发灶和转移灶,87%（147/169）的单位常规进行HER2检测。84.6%（143/169）和91.1%（154/169）分别对于多中心性乳腺癌和乳腺微浸润性癌常规进行HER2检测。3.每一位医生对比其他34位医生HER2判读的一致性分析,平均kappa值为0.568,一致性较差。所有病理医生判读每一个HER2病例的平均正确率为0.825。每位医生HER2判读的平均正确率为0.746,与金标准对比的平均kappa值为0.711。结论:1.通过此次调查问卷对于HER2检测及判读存在的问题有较明确的认识,标本固定时间、免疫组化方法及抗体的选择对于HER2检测阳性率影响明显,建议标本及时固定,选用规范化试剂盒及检测流程。2.病理医生之间判读的准确性和一致性较差,提高乳腺癌HER2判读一致性和准确性是亟待解决的问题。第二部分人工智能辅助对乳腺癌HER2判读的一致性和准确性研究目的:乳腺癌中HER2蛋白和基因表达的水平是判断乳腺癌患者预后的重要因素。几项研究表明,显微镜下判读HER2时病理医生内部和病理医生之间的差异很大。在这项研究中,我们旨在分析人工智能（Artificial intelligence,AI）辅助HER2判读的准确性和可靠性。方法:我们从6家医院招募了33名病理学家,对50例未经新辅助治疗的非特殊亚型浸润性乳腺癌病例进行了三轮研究。在第一轮研究（RS1）中,病理学家通过在线系统判读了50张HER2数字病理图像（WSI）。经过2周的遗忘期后,他们使用第二轮研究（RS2）中的常规显微镜判读HER2切片。再经过2周的遗忘期后,在第三轮研究（RS3）中病理学家使用人工智能辅助判读HER2切片。人工智能辅助细胞水平分类的HER2评分算法和增强现实模块,以使病理学家能够实时获取人工智能结果。结果:1.与传统显微镜和在线WSI判读相比,AI辅助判读的一致性和准确性均得到了显著提高（P<0.001）。2.在三轮研究中对HER2评分的混淆矩阵显示,与RS1相比,IHC 1+和2+病例在AI辅助判读下的召回率显著提高（P<0.05）。与RS1和RS2相比,在AI辅助判读下IHC 2+和3+病例的准确性显著提高（P<0.001）。AI辅助提高了IHC 3+和2+评分的精确度,同时确保了IHC 2+中荧光原位杂交（FISH）阳性结果的召回率。3.所有病理学家对AI的平均接受率为0.90,表明病理学家同意大多数AI评分结果。结论:AI辅助提高了病理学家判读HER2的准确性和一致性。AI辅助是病理学家进行HER2 IHC诊断的实用工具,结合了人类和AI的优势,并且可以与当前的临床工作流程无缝集成。第三部分乳腺微浸润性癌及T1a期患者HER2表达的病理研究目的:探讨乳腺微浸润性癌及T1a期患者HER2表达与临床病理特征的关联,筛选适合HER2靶向治疗的患者,以及原位癌与浸润区HER2表达的一致性。方法:收集河北医科大学第四医院2015年1月-2020年6月入院治疗的乳腺微小浸润性癌及乳腺癌T1a期患者共217例。分别判读其原位癌与浸润区的HER2表达状态。PRECICE 600全自动数字切片扫描仪扫描HE染色切片。病理医生使用ASAP软件对乳腺癌的浸润灶进行标注,由机器学习模型提取标注区内的形态学特征。结合病理特征和形态学特征构建预测早期乳腺癌的HER2表达状态的诺模图。卡方检验或Fisher精确检验比较不同组别的分类变量。Mann-Whitney U检验比较不同组别之间的连续变量的差异。Spearman分析与HER2表达相关的临床病理特征。“R”包绘制诺模图。Mc Nemar’s检验分析乳腺微浸润性癌及T1a期患者原位癌和浸润区HER2表达的一致性。结果采用SPSS 26.0统计软件分析。结果:1.高核级、粉刺样坏死、高度TILs浸润和高增殖指数的早期乳腺癌患者更容易出现HER2阳性表达（P均<0.001）。2.乳腺微小浸润癌和T1a期患者的原位癌和浸润区HER2表达无明显差异（P=0.25和P=0.50）。乳腺微小浸润癌和T1a期患者的原位癌和浸润区的HER2表达总一致率为97.7%（212/217）。3.与早期乳腺癌HER2阳性表达相关性最强的特征是浸润灶直径（rho=-0.468,P<0.001）。浸润灶直径>2mm时HER2阳性率明显下降（从52.6%-16.1%,P<0.001）。结论:1.早期乳腺癌HER2阳性表达与许多不利的传统预后因素有关,表明该早期乳腺癌亚型具有侵袭性生物学表型,可能从辅助化学疗法和免疫疗法中受益。2.乳腺微小浸润癌和乳腺癌T1a期的原位癌和浸润区的HER2表达一致率较高,对于浸润灶较小无法评估浸润癌区域HER2表达状态的病例,可以参考原位癌区域的HER2表达。3.与浸润灶直径1-2mm的T1a期乳腺癌相比,浸润灶直径2-5mm的乳腺癌患者恶性程度更高,推荐对浸润灶直径2-5mm的HER2阳性乳腺癌患者应用HER2靶向治疗。