新疆达坂城盐湖中度嗜盐菌的微生物多样性的研究与Athelia rolfsii酸性甘露糖酶的分离纯化及性质的研究

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中度嗜盐菌作为一类微生物资源,已经在很多方面应用。从新疆达坂城盐湖样品中分离得到17株中度嗜盐菌。其中11株为革兰氏阳性,6株为革兰氏阴性,并于中科院微生物所完成表型和16S rDNA序列的测定。其表型特征和16S rDNA序列分析结果表明这些菌分别属于Halomonas、Bacillus、Salinicoccus、Halobacillus、Marinococcus、Thalassobacillus、Nesterenkonia属,其中大部分属于Halomonas属。产β-甘露聚糖酶的Athelia rolfsii菌株CBS 191.62,发酵培养5d,发酵液离心去菌体,上清经硫酸铵沉淀,琼脂糖凝胶(DEAE Sepharose Fast Flow)层析、羟基磷灰石(Hydroxylapatite)层析和冷冻干燥结晶等步骤,β-甘露聚糖酶的比活提高了15.1倍,获得凝胶电泳均一的蛋白样品。经SDS-PAGE测定β-甘露聚糖酶分子量为15 kDa,证明该酶为单聚体;用等电聚焦电泳测得其等电点为2.95;该酶的最适反应温度为30℃,在不超过40℃时酶活较稳定;酶反应的最适pH为5.0,pH稳定范围为4.2~6.8。重金属离子Zn2+、Fe3+、Co2+、Hg2+能强烈抑制该酶活性,而Mg2+、Al3+对该酶有部分的抑制作用,低浓度的Li+、Mn2+、Ca2+对该酶基本没有影响。
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