重组人生长激素对梗阻性黄疸大鼠肝切除术后肝功能及肝再生影响的实验研究

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目的:探讨重组人生长激素对梗阻性黄疸大鼠肝切除术后肝功能和肝再生的影响,提供重组人生长激素临床应用的理论依据。材料与方法:1.动物分组:健康雄性SD大鼠72只(购自长沙市开福区湘品生物有限责任公司),体重320±20g,饲养清洁环境,术前及术后均自由进食水,12小时昼夜规律生活。大鼠随机分为4组:1. SN(SO-NS)组:假手术肝切除NS注射组2. SG(SO-rhGH)组:假手术肝切除rhGH注射组3. ON(OJ-NS)组:梗阻性黄疸左肝小叶切除NS注射组4.OG(OJ-rhGH)组:梗阻性黄疸左肝小叶切除rhGH注射组。2.动物模型制备:(1)SN组、SG组:10%水合氯醛按0.3ml/kg腹腔注射麻醉,取仰卧位,四肢固定,腹部备皮,碘伏消毒,铺洞巾,腹正中白线进腹,找到胆总管,予以翻动第一肝门后关腹。5天后,游离左肝小叶,予以结扎左肝肝蒂切肝,行胆道外引流后关腹。SN组予以每日皮下注射1ml/kg生理盐水,SG组予以每日皮下注射1ml/kg重组人生长激素。(2)ON组、OG组:10%水合氯醛按0.3ml/kg腹腔注射麻醉,取仰卧位,四肢固定,腹部备皮,碘伏消毒,铺洞巾,腹正中白线进腹,找到胆总管,予以0#丝线结扎后关腹。5天后,游离左肝小叶,予以结扎切肝,在已接扎的胆总管平面上3mm行胆道外引流后关腹。SN组予以每日皮下注射1ml/kg生理盐水,SG组予以每日皮下注射1ml/kg重组人生长激素。3.指标检测:各时相6只SD大鼠,各组分别在术后24h、72h、120h时间点处死大鼠,利用术后残肝重量和大鼠体重测定肝再生率;应用全自动生化分析仪检测血清总胆红素(TIBL)、谷丙转氨酶(AST)、白蛋白(ALB);残肝行HE染色,光镜下观察肝组织的有丝分裂情况,统计有丝分裂细胞数,即核分裂指数;免疫组化染色检测PCNA的表达。结果:1.大鼠术后肝功能测定未行梗阻性黄疸的大鼠行肝切除,术后第24h、72h、120h,SG组比SN组ALT下降快,P<0.05,差异有统计学有意义;术后第24h、72h,SG组比SN组ALB高,P<0.05,差异有统计学有意义。而对于胆道梗阻后的大鼠行部分肝切除,术后第72h、120h,SG组比SN组TBIL下降快,P<0.05,差异有统计学有意义;术后24h、72h、120h,SG组比SN组ALT低,ALB升高,P<0.05,差异有统计学有意义。2.大鼠术后肝再生功能评价SG组对比SN组在术后第24h、72h、120h的肝再生率、肝细胞核分裂相高,P<0.05,差异有统计学有意义; SN组比ON组在术后24h、72h、120h肝再生率、肝细胞核分裂相高,P<0.05,差异有统计学有意义; OG组比ON组在术后第24h、72h、120h的肝再生率、肝细胞核分裂相高,P<0.05,差异有统计学有意义;OG组比SG组在术后第24h、72h、120h,肝再生率、肝细胞核分裂相低,P<0.05,差异有统计学有意义;另外对于免疫组化PCNA研究中我们发现,在未梗阻的部分肝切除术SN组、SG组的肝再生率、肝细胞核分裂相、PCNA高峰出现于术后第24h,而梗阻性部分肝切除术ON组、OG组肝再生率、肝细胞核分裂相、PCNA高峰出现于术后第72h。对于相同时间点,SG组PCNA数多于SN组,OG组PCNA组数多于ON组。而对于相同时间点的ON组PCNA数少于SN组,OG组PCNA组数少于SG组。结论:1.使用重组人生长激素有利于梗阻性黄疸大鼠部分肝切除术后肝功能恢复;2.使用重组人生长激素能促进梗阻性黄疸大鼠肝切除术后残肝再生,促进肝再生高峰提前。
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