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背景:类风湿关节炎(Rhermatoid arthritis,RA)是一种系统性自身免疫性疾病,滑膜炎为其关键的病理环节,滑膜细胞凋亡障碍所导致的滑膜细胞大量增生是滑膜炎的免疫反应得以持续的主要问题所在。青藤碱(Sinomenine, SN)是从中药青风藤(Sinomenium scutum Rehd et Wils)中提取的生物碱单体。在治疗RA方面,该药具有较明确的疗效,但其治疗机制尚不十分明确。我们推测,诱导滑膜细胞凋亡可能是SN治疗RA的机制之一。因此,我们将观察SN对RA患者滑膜细胞凋亡及增殖的影响,从细胞周期及凋亡蛋白Bcl-2表达的变化来探讨其作用机制,为SN在临床上的应用提供实验依据。方法:酶消化法进行RA滑膜细胞原代培养,本实验采用3～10代成纤维样滑膜细胞(FLS),用光镜、电镜等方法对培养细胞进行形态学观察。当细胞培养至对数生长期后,分为4组并作以下处理:(1)1组(正常对照组):细胞培养液中不含SN;(2)2组:正常对照+ 2.8 mmol/L SN;(3)3组:正常对照+ 3.0 mmol/L SN;(4)4组:正常对照+ 3.2 mmol/L SN。培养24或48 h后,用光镜、荧光显微镜、流式细胞仪Annexin V-FITC及PI双标记法检测SN诱导RA滑膜细胞的凋亡效应,MTT法检测SN抑制滑膜细胞增殖的影响,流式细胞仪检测SN作用48 h时RA滑膜细胞周期及凋亡蛋白Bcl-2表达水平的变化。结果:1. 2.8 mmol/L、3.0 mmol/L、3.2 mmol/L的SN分别作用24或48 h后滑膜细胞出现凋亡表现,如细胞变圆、胞体皱缩、细胞核荧光染色增强等。2. 2.8 mmol/L、3.0 mmol/L、3.2 mmol/L的SN作用24、48 h能够抑制滑膜细胞增殖,诱导细胞凋亡,与对照组相比有显著差异(P<0.05),其中以3.2 mmol/L浓度的SN作用48 h后诱导凋亡及抑制增殖最为显著。3.细胞周期显示SN的作用在G1～S期,并能阻滞G1期细胞向S期移行。4. 2.8 mmol/L、3.0 mmol/L、3.2 mmol/L的SN作用滑膜细胞48 h后,随SN浓度的增加,Bcl-2蛋白表达量逐渐下降。结论:SN在一定浓度及作用时间内可通过阻滞G1期细胞向S期移行及下调Bcl-2基因的表达而抑制RA患者滑膜细胞增殖,诱导凋亡,这可能是SN治疗RA机制之一。