VGLL1在膀胱癌中的表达及临床意义

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目的:膀胱癌是泌尿系统最常见、发生在膀胱黏膜的恶性肿瘤,也是全身十大常见肿瘤之一。在中国,2000到2011年间,膀胱癌是发生率增加的六大男性恶性肿瘤之一。数据显示,浅表型膀胱癌新发病例中,接近54%的癌症患者在术后出现病情复发,其中有近10%的患者肿瘤病情进展为肌层浸润(即T2期或更重)。膀胱癌的病因复杂,既有内在遗传因素,又有外在环境因素,因此对于膀胱癌发生发展、侵袭转移相关机制的深入研究对于疾病认识乃至潜在治疗方案的发掘至关重要。  VGLL1,是最早被发现的VGLL家族成员,通过与TEAD结合对组织器官发育发挥重要作用。研究显示,VGLL1与Hippo信号通路中重要的效应因子YAP蛋白在结构及作用方式上具有相似性,可能在肿瘤发生发展过程中发挥潜在的作用。本研究通过对临床明确诊断为膀胱癌患者的膀胱癌组织、癌旁组织、膀胱癌细胞系(5637、BIU87、RT4、T24、)以及正常膀胱细胞系(SV-40)中VGLL1表达水平进行对比分析,明确VGLL1在膀胱癌中的表达变化,进一步了解其与膀胱癌临床病理分期、分级的关系,为未来对于VGLL1在膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭等生物学行为中作用的探索奠定基础。  研究方法:1、收集30例临床病理明确诊断为膀胱癌的患者的癌组织及癌旁组织(距离癌组织>5cm),标本液氮转移,-80℃冰箱保存。2、依据WHO2004膀胱尿路上皮癌恶性程度分级法对病例进行分级并分为高级别组和低级别组;参考膀胱癌2009TNM分期法,将病例分为肌层浸润组(A组)和非肌层浸润组(B组)。3、运用Real Time PCR技术和Western Blot技术分析检测VGLL1在膀胱癌组织中mRNA水平和蛋白水平的表达情况,同时比较VGLL1在不同病理分期、分级的膀胱癌组织中的表达差异。4、利用细胞培养技术,培养5637、BIU87、RT4、T24共4种膀胱癌细胞系和SV-40正常膀胱细胞系,比较VGLL1在不同膀胱癌细胞系中表达水平的差异。5、应用Imagel、Graphpad prism5.0等软件对实验数据进行整理、统计、分析并接受P<0.05具有统计学意义。  结果:1、相比于癌旁组织,VGLL1在膀胱癌组织中表达水平明显升高。2、在不同病理分级的膀胱组织中,高级别的膀胱癌组织中VGLL1表达水平较低级别癌组织升高更显著。3、在不同TNM分期的膀胱组织中,相比于非肌层浸润性膀胱癌组织,肌层浸润性的膀胱癌组织中VGLL1的表达水平升高明显。4、4组不同膀胱细胞系中VGLL1表达水平均较正常膀胱细胞系显著升高。此外,VGLL1在T24细胞系中表达最高,其次为BIU87、RT4和5637细胞系。  结论:在膀胱癌组织及细胞中,VGLL1表达较癌旁组织及正常细胞明显升高;VGLL1表达水平越高提示更高病理级别及分期的膀胱癌,提示VGLL1可能是膀胱癌临床病理诊断的潜在指标。
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