TLR4/NF-κB信号通路在振动运动对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化中的作用

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目的通过对动脉粥样硬化饮食诱导的ApoE-/-小鼠进行振动运动干预,观察振动运动对小鼠动脉粥样硬化的影响及可能的机制。方法1、选用健康雄性8周ApoE-/-小鼠32只,随机分为2组:正常饮食组(16只),动脉粥样硬化饮食组(16只),分别给予普通及动脉粥样硬化饲料喂养8周。8周后,正常饮食组的小鼠随机分为两组:正常对照组(NC组,8只)、正常振动组(NV组,8只),AS组随机分为两组:AS对照组(AC组,8只)、AS振动组(AV组,8只)。对NV组和AV组两组小鼠进行振动干预,振动模式为:频率15HZ,振幅峰值2.0mm,时间为30min/次,1次/天,6d/周,周期12周。2、12周振动实验结束后,称量各组小鼠体重,酶法检测血清HDL和LDL含量,ELISA方法检测血清ox-LDL和VLDL含量,通过油红O染色、HE染色和Massion染色观察主动脉粥样斑块表面积、泡沫细胞和胶原纤维。Western Blot检测主动脉TLR4/NF-κB信号通路中TLR4、MyD88、NF-κB、IL-1、IL-6的蛋白半定量表达。结果1、各组ApoE-/-小鼠体重、血脂:12周振动运动结束后,各组小鼠体重无明显变化,差异无统计学意义。与NC组相比,AC组血清HDL明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),LDL、VLDL和ox-LDL未见明显变化,差异无统计学意义,NV组HDL明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),LDL和VLDL明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),ox-LDL无明显变化,差异无统计学意义。与AC组相比,AV组血清LDL、VLDL和ox-LDL显著下降,差异有统计学意义(P<0.01),HDL无明显变化,差异无统计学意义。2、各组ApoE-/-小鼠主动脉油红O染色:与NC组相比,AC组斑块面积明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。NV组斑块面积减少,但差异无统计学意义。与AC组相比,AV组斑块面积减少,此差异具有统计学意义(P<0.05)。3、各组ApoE-/-小鼠主动脉HE染色:与NC组相比,AC组斑块内泡沫细胞明显增多,斑块内坏死结晶增多,主动脉内膜明显增厚。NV组主动脉内膜较光滑,仅有突起。与AC组相比,AV组斑块内泡沫细胞减少,坏死核心减少。4、各组ApoE-/-小鼠主动脉Massion染色:与NC组相比,AC组斑块内胶原纤维减少。NV组胶原纤维增多。与AC组相比,AV组斑块中胶原纤维增加。5、各组ApoE-/-小鼠主动脉TLR4/NF-κB通路蛋白Western Blot表达:与NC组相比,AC组主动脉组织表达TLR4、MyD88、IL-6明显增多,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.001),NF-κB、IL-1无明显变化,差异无统计学意义。NV组NF-κB明显减少,差异有统计学意义(P<0.001),TLR4、MyD88、IL-1、IL-6无明显变化,差异无统计学意义。与AC组相比,AV组小鼠主动脉组织表达TLR4、NF-κB、MyD88、IL-1、IL-6明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.001)。结论振动运动可以减少小鼠血清中LDL、VLDL、ox-LDL及主动脉斑块面积,振动运动通过抑制TLR4/NF-κB信号通路延缓动脉粥样硬化的病变进展。
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