不同浓度比例OPG与DPB凝胶复合物对ACL重建术后骨隧道影响的实验研究

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目的:探讨不同浓度比例的骨保护素(OPG)与脱蛋白骨(DPB)凝胶复合物对前交叉韧带(ACL)重建术后骨隧道的影响。方法:取市售新鲜新生小牛股骨骺端,采用H2O2-甲醇/氯仿方法制备异种DPB,将其分别浸泡于浓度为30、60、100μg/mL的OPG溶液中,制成3种浓度比例(30%、60%、100%)的凝胶复合物。取健康新西兰大白兔60只,雌雄不限,体质量(2.7±0.4)㎏,随机分为4组(n=15),分别为空白对照组(A组)及30%、60%、100%OPG/DPB凝胶复合物组(B、C、D组)。各组建立自体跟腱重建ACL模型后,将不同浓度比例OPG/DPB凝胶复合物分别植入B、C、D组股骨及胫骨骨隧道内,A组不作处理。术后观察动物一般情况,于术后4、8、12周取材行大体观察(包括股骨隧道扩大率计算)、组织学观察以及生物力学检测。结果:术后A、D组各1只,B、C组各2只动物因感染死亡并补充。大体观察示,4周时各组股骨及胫骨骨隧道内口均有少量瘢痕组织覆盖;8周时股骨及胫骨隧道内口周围组织呈白色软骨样变,其中C、D组较明显;12周时A、B、C组股骨及胫骨隧道内口,D组股骨及胫骨隧道内口完全封闭。各时间点B、C、D组股骨隧道扩大率均显著低于A组,D组低于B、C组(P<0.05);除8周时C组股骨隧道扩大率显著低于B组(P<0.05)外,4、12周时B、C组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。组织学观察示,4周时各组可见新生纤维结缔组织生长;8周时各组可见排列不一的Sharpey纤维,D组偶见不典型的4层结构;12周时Sharpey纤维排列有序,除A组外其余组均可见典型的4层结构,形成不规则的“潮线”,尤以D组最显著。生物力学测试示,除C组12周和D组8、12周时均为韧带实质断裂外,其余各时间点主要是从骨隧道拔出,其中以从股骨隧道拔出多见。术后4周时,D组最大抗拉力负荷显著大于A、B组(P<0.05);A、B、C组间以及C、D组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。8周时,C、D组大于A组,D组大于B组(P<0.05);其余组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。12周时,C、D组大于A、B组,D组大于C组(P<0.05);A、B组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:不同浓度比例OPG/DPB凝胶复合物对ACL重建术后骨隧道影响程度不同,100%OPG/DPB凝胶复合物预防骨隧道扩大、促进腱-骨愈合作用最显著。
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