α-地中海贫血疾病特异性诱导多能性干细胞的建立及造血干细胞培养体系的优化

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胚胎干细胞(embryonicstemcell,ES)来源于早期的胚胎囊胚内细胞团,具有高度的发育潜能,可以分化成除滋养层来源的细胞以外的所有三胚层细胞。胚胎干细胞自发现以来,由于在再生医学和科学研究中的巨大潜能,它引起了人们极大的关注。但由于其在伦理道德等方面的局限性,ES细胞的应用受到了很大制约。诱导多能性干细胞(inducedpluripotentstemcell,iPSC)的出现使这些问题的解决出现了曙光,它突破了伦理道德的壁垒,在不破坏胚胎的前提下,就可以产生大量与ES细胞功能相同或类似的细胞。iPS技术提供了直接从患者本身获得所需研究材料的手段,所获得的疾病特异性iPS细胞及其终端分化细胞可以被用来研究疾病病理机制、药物筛选等。本研究以患有α-地中海贫血的病人的成纤维细胞为供体细胞,通过逆转录病毒将Oct4,Sox2.Klf4和c-Myc四个转录因子导入到病人的成纤维细胞中,经诱导后得到一株α-地中海贫血疾病特异性的iPS细胞,并进行了初步鉴定。  造血干细胞(hematopoieticstemcell,HSC)是目前了解最为透彻的成体干细胞,广泛应用于癌症、血液紊乱病、自身免疫病等许多方面。但目前应用于临床HSC来源有限,而且造血干细胞在体外培养过程中增殖潜能不断降低。实验中我们利用磁珠分选的方法得到CD34+细胞,在培养基中添加实验用小分子物质优化培养体系,培养五天后对CD34阳性率进行比较,发现加入实验中所用的小分子后CD34阳性率明显升高,说明所加入的小分子对CD34+细胞比例的提高有促进作用,即使培养体系得到了优化。
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