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目的:探讨老年大鼠脑内囊泡单胺转运体2(VMAT2)的表达变化。
方法:雄性Wistar大鼠20只随机分为6月龄组(6Mon)和24月龄组(24Mon),每组各10只。免疫组织化学和免疫印迹技术观察大鼠脑内黑质(SN)、尾壳核(CPu)、腹侧被盖区(VTA)和伏核(Acb)四个脑区VMAT2的表达变化。
结果:
1.免疫组织化学染色结果:24月龄组大鼠SN的VMAT2的AOD值比6月龄组降低7.2%(P<0.05);CPu的背内侧(DM)、腹内侧(VM)、腹外侧(VL)和背外侧部(DL)四个亚区VMAT2的AOD值比6月龄组分别降低18.9%(P<0.01)、14.3%(P<0.01)、19.9%(P<0.01)和22.8%(P<0.01)。VTA的VMAT2的AOD值比6月龄组降低14.2%(P<0.01);Acb的核心部(Core)和壳部(Shell)两个亚区VMAT2的AOD值比6月龄组分别降低15.8%(P<0.01)和18.1%(P<0.01)。
2.免疫印迹结果:VMAT2的免疫印迹显示三个条带,分别为75KDa的糖基化VMAT2(Glyco-VMAT2)、55KDa的部分糖基化VMAT2(Partially glyco-VMAT2)和45KDa的原型VMAT2(Native-VMAT2)。24月龄组大鼠SN的Glyco-VMAT2、Partially glyco-VMAT2和Native-VMAT2与GAPDH免疫印迹条带相对吸光度比值比6月龄组分别降低57.1%(P<0.01)、33.8%(P<0.01)和50.7%(P<0.01);CPu的Glyco-VMAT2、Partially glyco-VMAT2和Native-VMAT2与GAPDH免疫印迹条带相对吸光度比值比6月龄组分别降低27.2%(P<0.01)、36.4%(P<0.01)和29.9%(P<0.01);VTA的Glyco-VMAT2、Partiallyglyco-VMAT2和Native-VMAT2与GAPDH免疫印迹条带相对吸光度比值比6月龄组分别降低41.9%(P<0.01)、30.3%(P<0.01)和38.6%(P<0.01);Acb的Glyco-VMAT2、Partially glyco-VMAT2和Native-VMAT2与GAPDH免疫印迹条带相对吸光度比值比6月龄组分别降低47.9%(P<0.01)、28.3%(P<0.01)和19.0%(P<0.01)。
结论:老年雄性大鼠脑内黑质、尾壳核、腹侧被盖区和伏核四个脑区VMAT2的表达显著降低,为衰老过程中出现的行为障碍提供了理论依据,暗示在衰老过程中提高VMAT2的表达可能起到神经保护作用。