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本文针对我国规模化奶牛场科学利用酸化乳饲喂犊牛缺乏理论依据的问题,开展饲喂酸化乳对犊牛生长性能、血液免疫指标和粪便微生物多样性影响的研究,探索犊牛自由采食酸化乳的饲喂效果,旨在为国内更好的应用酸化乳提供理论依据。(1)巴氏杀菌乳和酸化乳营养成分、p H值与细菌数量的比较本试验对比了相同来源牛乳经甲酸酸化和巴氏杀菌后乳成分、p H值及细菌数量的变化。试验结果表明,巴氏杀菌乳和酸化乳的营养成分均差异不显著,仅酸化乳尿素氮含量极显著高于巴氏杀菌乳(P<0.01),p H值极显著低于巴氏杀菌乳(P<0.01),且酸化乳显著降低了乳中大肠杆菌数(P<0.05),极显著降低了乳中总菌数(P<0.01)。(2)饲喂酸化乳对犊牛生长性能的影响本试验采用完全随机试验设计,选用某规模化奶牛场出生3 d、体高和体重相近的健康荷斯坦母犊牛20头,随机分为2组,每组5个重复,每个重复2头。PM组(对照组)饲喂巴氏杀菌乳,AM组(试验组)饲喂酸化乳,试验期共180 d,其中哺乳期60 d。记录液体饲料和固体饲料采食量,并测量体尺体重,计算日增重和体尺指数,每日记录粪便评分,并计算腹泻率。试验结果表明,犊牛31-40 d、41-50 d时,AM组液体饲料采食量极显著高于PM组(P<0.01);61-90 d时,AM组犊牛固体饲料采食量极显著高于PM组(P<0.01)。犊牛60 d和180 d时,AM组犊牛体重均极显著高于PM组(P<0.01),90 d时AM组犊牛体重显著高于PM组(P<0.05);犊牛31-60 d、61-180 d和7-180 d时,AM组日增重均显著高于PM组(P<0.05)。犊牛7 d时,体尺指标差异均不显著;犊牛30 d时,AM组犊牛腿围和腿围指数显著高于PM组(P<0.05),胸深极显著高于PM组(P<0.01),肢长指数极显著低于PM组(P<0.01);犊牛60 d时,AM组体高和管围均显著高于PM组(P<0.05),体直长、胸围和胸深均极显著高于PM组(P<0.01),肢长指数和腿围指数显著低于PM组(P<0.01);犊牛90 d时,AM组管围显著高于PM组(P<0.05),体直长、体斜长、体高、胸围和胸深均极显著高于PM组(P<0.01),AM组腿围指数极显著低于PM组(P<0.01);犊牛180 d时,AM组体直长、体斜长、体高、胸围和胸深均极显著高于PM组(P<0.01),体长指数显著高于PM组(P<0.05),但肢长指数和体躯指数显著低于PM组(P<0.05)。犊牛各时期内,AM组粪便评分及腹泻率均显著低于PM组(P<0.05)。(3)饲喂酸化乳对犊牛血液免疫指标的影响于犊牛饲养期的第7 d、30 d、60 d、90 d和180 d晨饲前采集犊牛血液,测定血液中血常规指标和血液免疫指标含量。试验结果表明:30 d时,AM组犊牛WBC、LYM和LYM%均显著高于PM组(P<0.05),TNF-α、IL-1β含量和IL-6含量均显著低于PM组(P<0.05);60 d时,AM组犊牛WBC、LYM、LYM%、IL-1β和IL-6含量均显著低于PM组(P<0.05),Ig A含量均显著高于PM组(P<0.05);90 d时AM组LYM%、IL-1β含量显著低于PM组(P<0.05),Ig M含量、Ig G含量均显著高于PM组(P<0.05);180 d时,AM组Ig M含量显著高于PM组(P<0.05)。(4)饲喂酸化乳对犊牛粪便微生物多样性的影响分别在犊牛饲养期的50 d和90 d时,每处理组选取5头体重相近的犊牛,刮取犊牛直肠末端粪样约20 g,进行16S r DNA扩增及测序。50 d时饲喂酸化乳犊牛的粪便为AB组,饲喂巴氏杀菌乳犊牛的粪便为PB组,90 d时饲喂酸化乳犊牛的粪便为AP组,饲喂巴氏杀菌乳犊牛的粪便为PP组,试验结果表明共获可用于后续分析的Tags序列1,227,017条。按组别进行OTU聚类分析,结果显示饲喂酸化乳犊牛粪便中特有OTU数均低于饲喂巴氏杀菌乳组。4组样品丰度最高的细菌为厚壁菌门(Firmicutes),其次是拟杆菌门(Bacteroidetes)和梭杆菌门(Fusobacteria)。经LEf Se(LDA Effect Size)分析显示,AB组较其他组具有显著性差异的物种有拟杆菌科(Bacteroidaceae)、拟杆菌属(Bacteroidetes)、Faecalibacterium、瘤胃梭菌属(Ruminiclostridium9)、拟普雷沃菌属(Alloprevotella)、毛螺旋菌属(LachnospiraceaeUCG004)、毛螺菌属(LachnospiraceaeUCG010)、芽孢杆菌纲(Bacill)、乳杆菌目(Lactobacillales)、布劳特氏菌属(Blautia),其中影响最大的为拟杆菌科(Bacteroidaceae)和拟杆菌属(Bacteroidetes)。综上所述,利用甲酸酸化对牛乳成分影响不大,可抑制牛乳中有害细菌生长,提高适口性;并在自由采食的条件下,酸化乳可增加采食量,降低犊牛腹泻率,改善粪便评分,有助于犊牛生长发育,改善机体免疫力并可能对犊牛肠道菌群平衡产生一定调节作用,但其调节机制机理还有待于进一步研究。