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鸡传染性喉气管炎（ILT）是由传染性喉气管炎病毒（ILTV）引起的一种鸡急性上呼吸道传染病，呈全球性流行，是危害养禽业的重要疫病之一。目前ILT的防制都是使用减毒活疫苗。这些疫苗的毒力普遍偏强，可以在鸡体内潜伏感染，而且在鸡体传代过程中毒力返强。因此，研制更安全而有效的疫苗，将有利于彻底控制乃至根除ILT。gB是ILTV的主要免疫原，已经证实α疱疹病毒的gC和gD在诱导机体免疫应答方面也有重要作用。因此，本研究在构建了表达ILTV主要抗原基因的真核表达质粒的基础上进行了ILTV基因免疫的效力及CpG佐剂作用的研究，为ILTV的防制探索新的途径。 根据已发表的ILTV SA2疫苗株的gB、gD基因序列设计了两对引物，以ILTV王岗株DNA为模板，通过PCR方法分别扩增了ILTV王岗株的gB、gD基因，扩增产物经EcoRI酶切后克隆至真核表达载体质粒pCR3-Uni中，得到重组真核表达质粒PgB和PgD。对PgB、PgD进行序列分析，结果表明，ILTV王岗株gB基因的编码序列全长2619bp，与英国的Throne882和美国的632强毒株的gB基因序列完全一致，与SA2株相应序列的核苷酸同一性为99.8％。ILTV王岗株gD基因的编码序列全长1134bp，与SA2株相应序列的核苷酸同一性为97％。将已克隆的王岗株gC基因亚克隆至真核表达质粒pCR3-Uni，得到重组质粒PgC。序列分析结果表明，ILTV王岗株gC基因编码序列全长1245bp，与SA2株相应序列的核苷酸同一性为99％。 将重组质粒PgB、PgC、PgD及空载体质粒大量纯化后进行动物免疫试验。试验分组如下：（A）生理盐水；（B）空载体质粒；（C）减毒疫苗；（D）PgB；（E）PgB+PgC+PgD。质粒组（B、D、E）的免疫剂量为100ug/羽，E组三种质粒的剂量各为100ug/羽，用前混匀，质粒四点肌肉注射SPF鸡，三周龄时第一次免疫，五周龄时第二次免疫，C组五周龄时滴眼接种减毒疫苗。以MTT法测定免疫后不同周龄各组鸡胸腺、法氏囊淋巴细胞的增殖反应活性，以间接ELISA法测定血清抗体水平。对免疫鸡九周龄时以致死剂量的ILTV王岗株攻击，统计攻毒后的发病、死亡、保护情况及病毒检测结果。实验结果表明，ILTV基因免疫诱导了较强的淋巴细胞增殖反应，攻毒后血清抗体在免疫后第二周发生阳转，并在加强免疫后达到高峰，而对照组无相应变化。攻毒后各组鸡的存活率为，重组质粒组（D和E组）79％，减毒疫苗组（C组）100％，对照组（A和B组）14％，这一结果表明ILTV基因免疫产生了较强的保护作用。孟松树传染性喉气管炎肩毒基因兔疫的研究2000年6月 将！LTV ＆因疫苗即由或PgB＋PgC＋PgD与宫含CpG序列的细菌DNA联合免疫SPF鸡，检测免疫后不同周龄鸡胸腺、法氏羹淋巴细胞的增殖反应活性及血清抗体水平，并观测攻毒后的免疫保护惰况。结果表明，与不加 CpG DNA的基因兔疫组相比，CpG DNA槽强了胸腺、法氏羹淋巴细胞的增殖活性，血清抗体水平有所提高，发病串和死亡率明显降低，攻毒后存活串有 79％提右到 86％，这表明 CpG DNA对 ILTV基因免疫效果有明显的增强作用。 本研究是IW ＄因免疫的首次报道，为ILTV新型疫苗的研制奠定了基础。