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本试验旨在研究妊娠期限饲对山羊胎盘发育的影响,同时探讨在营养供给不足情况下胎盘形态学、营养物质转运、血流与血管发育相关方面的改变,探索可能的营养转运通路。本试验选取健康的发情时间相近且受孕的24只湘东浏阳黑山羊,分别进行妊娠早期或晚期限饲试验。早期限饲试验于妊娠日龄26-65d进行,12只黑山羊随机分为对照组和限饲40%组,每组6个重复,每个重复1只,试验期结束时屠宰,采集母羊血液、胎盘与胎羊,分离胎盘绒毛叶和子宫肉阜,计数并称重。晚期限饲试验在妊娠日龄95-125d进行,试验分组和样品采集同妊娠早期。胎盘形态学的检测指标包含:直接测定胎盘重、子宫肉阜和绒毛叶的重量和数量、胎羊重,计算胎盘相对重量、子宫肉阜和绒毛叶的相对重量和均重、绒毛叶密度,免疫组织化学法检测妊娠晚期绒毛叶中毛细血管密度。胎盘发育调控因子的检测指标包含:酶联免疫吸附试验测定母羊血清血管内皮生长因子(VEGF)、胆汁酸(TAB)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)的含量、绒毛叶和子宫肉阜组织中一氧化氮(NO)的含量,实时荧光定量测定绒毛叶和子宫肉阜组织中VEGFA、KDR(VEGFr2)、NOS1、NOS2基因mRNA的表达,相对与绝对定量同位素标记定量技术(iTRAQ)鉴定绒毛叶组织的差异蛋白,结果表明:1.妊娠早期限饲组胎盘总重和相对重量、子宫肉阜总重和相对重量、绒毛叶总重和相对重量、胎羊重显著升高(P<0.05),其中胎盘相对重量、绒毛叶相对重量和胎羊重差异极显著(P<0.01)。妊娠早期限饲对山羊胎盘的形态发育起促进作用,对胎羊的生长发育起促进作用。2.妊娠晚期限饲组胎盘重显著升高(P<0.05),胎羊重显著降低(P<0.05),绒毛叶中的毛细血管密度极显著降低(P<0.01)。妊娠晚期限饲显著提高山羊胎盘重量,但显著降低胎盘胎儿面绒毛叶的毛细血管密度,对胎羊的生长起显著抑制作用。3.妊娠早期限饲显著提高母羊血清NO含量(P<0.05),子宫肉阜中的NOS2基因表达量有升高趋势(P<0.1),胎盘绒毛叶中的NO含量呈现下降趋势(P<0.1)。母体对胎儿的营养供应由母羊血清NO调控,胎儿吸收母体营养由绒毛叶NO调控,而母羊血清NO的显著升高是主要调控因素,因此可能对促进胎儿的生长起到了一定的调控。妊娠早期的胎盘绒毛叶中共检测到104个蛋白,筛选出50个差异蛋白,其中27个上调蛋白,23个下调蛋白。对差异蛋白进行生物信息处理分析发现,妊娠早期胎盘绒毛叶中与妊娠相关的上调蛋白主要与滋养层细胞的增殖与分裂、胎盘血管生成相关,可能与妊娠早期限饲明显促进胎盘生长的结果有一定联系。4.妊娠晚期限饲对母羊血清指标无显著影响,妊娠晚期限饲组胎盘绒毛叶中的NO含量呈现下降趋势(P<0.1),子宫肉阜中的NOS1mRNA呈现升高趋势(P<0.1)。胎儿吸收母体营养主要由绒毛叶NO调控,因此可能对抑制胎儿的生长起到了一定调控。妊娠晚期的胎盘绒毛叶中共检测到149个蛋白,筛选出58个差异蛋白,其中38个上调蛋白,20个下调蛋白。妊娠晚期胎盘绒毛叶中与妊娠相关的上调差异蛋白与胎盘形成、血流调节、胚胎发育有关,下调差异蛋白与胎盘滋养层细胞迁徙和血管血流调控有一定联系,可能与妊娠晚期限饲明显促进胎盘生长却降低毛细血管密度的结果有一定联系。