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目的:探讨膜联蛋白a3(annexin a3 ANXA3)对结直肠癌奥沙利铂耐药的影响及其机制。方法:(1)采用药物浓度梯度递增间歇诱导法建立人结直肠癌耐奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)的耐药细胞株HT-29/L-OHP;运用RT-PCR、Western blot技术分别从m RNA及蛋白质水平检测ANXA3在HT-29细胞和HT-29/L-OHP奥沙利铂耐药细胞中的表达水平。(2)ANXA3-si RNA转染奥沙利铂耐药细胞株HT-29/L-OHP,沉默ANXA3基因表达,western blot检测基因沉默效果,筛选出干扰效率最高的si RNA序列。(3)CCK-8法测定L-OHP对奥沙利铂耐药细胞株HT-29/L-OHP和HT-29细胞株的半数抑制率(IC50);CCK-8检测ANXA3沉默前后HT-29/L-OHP对奥沙利铂的半数抑制率。Western blot检测ANXA3沉默前后低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1αHIF-1α)表达变化。(4)采用免疫组织化学法分析HIF-1α及ANXA3蛋白在结直肠癌奥沙利铂耐药组织和奥沙利铂敏感组织中的表达差异。结果:(1)成功建立了奥沙利铂耐药细胞株HT-29/L-OHP,耐药细胞株的耐药指数为3.72,且奥沙利铂对HT-29细胞株的半数抑制率为4.921?0.301μg.ml-1,对HT-29/L-OHP细胞株的半数抑制率为18.33?0.596μg.ml-1,且差异具有统计学意义(p=0.003<0.01)。(2)ANXA3在HT-29/L-OHP奥沙利铂耐药细胞中表达水平高于HT-29细胞,且在结直肠癌奥沙利铂耐药组织中的表达水平也高于奥沙利铂敏感组织。(3)HT-29/L-OHP细胞株对奥沙利铂的半数抑制率为(18.33?0.596)μg.ml-1,ANXA3 si RNA沉默ANXA3基因表达后,HT-29/L-OHP细胞对奥沙利铂的半数抑制率降至(9.321±1.816)μg.ml-1,且差异具有统计学意义(p=0.004<0.01)。(4)HIF-1α在奥沙利铂耐药细胞HT-29/L-OHP及组织中均显著高表达,且HIF-1α在结直肠癌组织标本中的表达水平与ANXA3呈正相关(相关系数Pearson为0.668),ANXA3 si RNA抑制HT-29/L-OHP耐药细胞株中ANXA3表达后,HIF-1α蛋白表达水平也随之降低。结论:ANXA3可能通过HIF-1α参与了结直肠癌奥沙利铂耐药性的形成,因此ANXA3可能是临床预测结直肠癌奥沙利铂耐药潜在分子标志物。