拟南芥白色叶脉回复突变体基因定位

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斑叶突变体表现为叶片颜色呈现深浅不一的表型。在斑叶突变体中有一类表现为植物叶脉与叶片之间出现颜色深浅的不同,称为网状突变体。网状突变体多是由核基因突变引起叶绿体发育及代谢变化。这些突变体对于研究叶肉细胞与植物维管束细胞的发育及叶绿体的发育及功能具有重要价值。var5是一个新发现的网状突变体,其特点是叶脉变白而叶片仍为绿色。导致该突变的基因为编码镁转运蛋白的MGT10(Magnesium transporter 10)。MGT10定位于叶绿体的外膜,在管束细胞中高表达。在mgt10缺失株中,叶脉出现黄白色,类囊体基粒增多,叶绿体镁离子含量升高,但MGT10如何影响叶绿体内镁离子转运,以及如何导致叶脉颜色异常仍然未知。本实验室在拟南芥EMS诱变过程中也筛选到mgt10突变体,为进一步探究MGT10的相关代谢通路,我们对mgt10白脉突变体进行EMS回复诱变,筛选到一些回复突变体。147回复株,60回复株的叶脉颜色都完全变绿。通过基因分析,确定这两个突变体是由核基因引起的单基因隐性突变。我们通过将回复株与白脉植株杂交产生F2代,将F2代回复株建立混池,通过二代测序与Mutmap方法定位了造成叶脉回复的候选突变基因,发现候选基因PKP1在147回复株中发生了终止突变。将野生型PKP1基因转入147回复株中,转基因植物出现白脉表型,确认了PKP1的突变是抑制mgt10出现白脉表型的一个原因。我们确定了PKP1定位于叶绿体中。对PKP1的生物信息学分析表明PKP1的启动子顺势元件中包含了很多与光响应相关的元件。为进一步研究MGT10的功能提供了研究基础。另外通过基因组测序分析,我们也确定了一些60回复株的候选基因。对于这些基因的功能验证正在进行中。
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