【摘 要】
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目的观察脂肪酸转运体(CD36)和肉碱脂酰转移酶1(CPT-1)在大鼠急性期高位脊髓损伤(SCI)心肌细胞中的表达,初步探讨脂肪酸代谢在高位脊髓损伤后心肌细胞损伤中的作用。方法1.清
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目的观察脂肪酸转运体(CD36)和肉碱脂酰转移酶1(CPT-1)在大鼠急性期高位脊髓损伤(SCI)心肌细胞中的表达,初步探讨脂肪酸代谢在高位脊髓损伤后心肌细胞损伤中的作用。方法1.清洁级健康雄性SD大鼠36只,体重250~300g,随机分为六组(每组n=6):空白组(CK组)、假手术组(Sham组)、高位SCI后4 h组(SCI 1组)、高位SCI后12 h组(SCI 2组)、高位SCI后24 h组(SCI 3组)和高位SCI后48 h组(SCI 4组);2.采用改良的Allens打击法建立高位SCI大鼠模型,Sham组暴露脊髓后不进行打击,术后观察并记录大鼠表现,在相应时点剪取大鼠同一部位心肌组织进行检测;3.用透射电镜观察大鼠心肌细胞的超微结构变化;4.用Western blot法检测心肌细胞CD36和CPT-1含量;5.用荧光定量PCR法测定心肌细胞CD36 mRNA的表达情况。结果1.SCI各组大鼠打击处的脊髓立即变为灰暗,术后活动量下降,双下肢弛缓性瘫痪,呼吸浅快,摄食减少,无自主排尿排便,Sham组大鼠术后正常活动;2.透射电镜结果显示Sham组大鼠心肌结构尚完善,与CK组比较无明显异常,SCI各组大鼠心肌细胞出现程度不一的心肌肌丝溶解、细胞膜外网状支架结构塌陷、膜下溶酶体聚集、线粒体结构破坏,细胞呈肿胀和空泡样坏死改变;3.Western blot检测结果显示Sham组大鼠心肌细胞CD36及CPT-1含量与CK组无明显差异(P>0.05),SCI各组心肌细胞CD36及CPT-1呈先增加后减少,其中SCI1组两指标含量增加,与Sham组比较差异有统计学意义(P<0.05),SCI 4组两者含量减少,与Sham组比较差异有统计学意义(P<0.05),而在SCI2组及SCI3组中两指标与Sham组比较无明显差异;4.PCR结果显示Sham组大鼠心肌细胞CD36 mRNA的相对表达量与CK组相比差异无统计学意义(P>0.05),SCI各组心肌标本中CD36 mRNA表达呈先增加后减少,其中,SCI 1组CD36 mRNA相对表达量增加,SCI 4组表达减少,两者与Sham组比较差异有统计学意义(P<0.05),而SCI 2组和SCI 3组较Sham组相比无明显差异。结论1.大鼠高位脊髓损伤后急性期出现心肌细胞超微结构改变,提示存在心肌损伤。2.大鼠高位脊髓损伤后急性期即出现CD36及CPT-1表达异常,提示脂肪酸代谢通路紊乱,此可能是高位脊髓损伤急性期心肌细胞能量代谢障碍引起心肌损伤的重要机制之一。
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