克百威降解菌KBW-1的分离鉴定及其降解特性的研究

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微生物修复与其它修复方法相比具有不可比拟的优势,因此,如何开发利用参与环境净化的微生物资源,已成为一项重要的研究课题。随着农业的发展和科技的进步,杀虫剂的应用得到大范围的提高,其中克百威因其杀虫范围广、效果好而得到了广泛的应用。克百威的毒性较高,长期大范围的使用造成大面积的土壤、地表水、地下水污染,给生态环境和人类健康造成了极大危害。本论文的研究目的是:分离克百威的高效降解菌,并对降解菌对克百威的降解特性进行研究,为今后进一步研究克百威污染土壤的生物修复奠定基础。研究采用微生物富集分离法,筛选得到一株克百威的高效降解细菌,编号为KBW-1。对该菌株进行了形态学、生理生化特性分析以及16S rDNA鉴定,并且研究了环境条件对其降解能力的影响以及该菌株在培养基和土壤中对克百威的降解特性,研究的具体内容及主要结果如下:1.从陕西杨凌某农药厂的排污口处采集污泥,将其作为菌源,在添加了克百威的无氮和无碳培养基中进行富集培养,分离得到24株菌株,从中选择长势良好的菌株进行降解能力的测定,最终获得3株降解能力较好的菌株。3株菌株在30℃、中性条件下,5 d内对200 mg·L-1的克百威的降解率均达到60%以上,其中以菌株KBW-1对克百威的降解效果最好,降解率达到100%。通过对其形态、生理生化特征以及16SrDNA的分析,将其鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)。2.菌株KBW-1对克百威的降解性能的研究结果表明,该菌株108h内对200 mg·L-1克百威的降解率高达100%;该菌对克百威具有较强的耐受能力,当克百威的浓度达到300 mg·L-1时仍能生长,且在168 h可以将其降解完全;在一定的范围内增加菌株KBW-1的接种量和培养基中葡萄糖的浓度,可以加快克百威的降解;菌株KBW-1降解克百威的最适温度为30℃,最适pH为7.0;在试验浓度范围内,外源营养物质的添加不会影响菌株KBW-1对克百威的降解;菌株KBW-1可以利用克百威作为唯一碳源或唯一氮源,当克百威作为唯一氮源时,菌株KBW-1生长得更好。3.菌株KBW-1对土壤中克百威的降解的研究结果表明,它在8天内对土壤中50 mg/kg克百威的降解率为65.67%;菌株KBW-1对克百威的降解能力在一定程度上受到了土壤中原有微生物的抑制。向土壤中添加营养物质可以提高菌株KBW-1对克百威的降解率,其中添加葡萄糖的效果最佳,可将降解率提高到88.64%。
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