【摘 要】
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新疆是我国最大的番茄种植加工基地,据不完全统计,2018年全新疆番茄耕种的总面积超越110万亩,番茄酱总产量达至101.83万吨。番茄皮渣是番茄酱处理过程中的工业废料,但其是番茄红素和多糖等活性物质较为丰富的来源。其中,番茄红素是一种很有应用前景的天然抗氧化剂,具有抗癌抗肿瘤、延缓衰老等多种功效,已被广泛应用于制药、化妆品、保健品等领域。目前,研究者将番茄红素视为番茄中最重要的活性成分,主要研究其
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新疆是我国最大的番茄种植加工基地,据不完全统计,2018年全新疆番茄耕种的总面积超越110万亩,番茄酱总产量达至101.83万吨。番茄皮渣是番茄酱处理过程中的工业废料,但其是番茄红素和多糖等活性物质较为丰富的来源。其中,番茄红素是一种很有应用前景的天然抗氧化剂,具有抗癌抗肿瘤、延缓衰老等多种功效,已被广泛应用于制药、化妆品、保健品等领域。目前,研究者将番茄红素视为番茄中最重要的活性成分,主要研究其提取工艺和生物活性,但对于番茄多糖、蛋白质及番茄籽油并未作出系统性研究。多糖是生命有机体中必不可少的成分,具有特殊的活性。因此,本研究以番茄皮渣为原材料,采用盐析萃取技术对其中番茄红素和多糖的提取工艺进行了研究,并对所获得的番茄红素和多糖粗提物进行柱层析纯化,将番茄皮渣中多种有效成分实现了一步提取与分离。首先,研究了酶辅助双水相萃取法从番茄皮渣中萃取番茄红素和多糖。研究了有机溶剂及无机盐含量、粉碎目数、料液比、静提时间、酶种类以及酶解条件对番茄红素和多糖得率的影响;并采用响应面法优化酶辅助双水相萃取番茄红素和多糖的工艺条件。结果表明,当双水相体系组成为31%(w/w)乙醇/16%(w/w)磷酸氢二钾,粉碎目数为160目,料液比为1:40 g/m L,静提时间为90 min,混合酶为果胶酶:菠萝蛋白酶1:1,酶量为2.0%,p H 6.0,酶解温度为50℃,酶解时间为119 min,番茄红素和多糖得率达到最大,分别为15.69 mg/100 g和77.16 mg/g。此外,DPPH法测得酶辅助双水相提取得到的番茄红素IC50为3.37μg/m L,抗氧化活性优于溶剂提取法。其次,研究了三液相萃取番茄皮渣中番茄红素和多糖。考察了正己烷、乙醇及无机盐含量等因素对萃取的影响。结果显示,三液相萃取番茄皮渣中叶番茄红素与多糖的最佳工艺为:9%(w/w)正己烷/33%(w/w)乙醇/17%(w/w)磷酸氢二钾,粉碎目数为160目,料液比为1:50 g/m L,室温静置分相90 min;傅里叶红外光谱显示上相提取物均为全反式番茄红素;该方法得到番茄红素和多糖得率均高于三溶剂介导萃取、超声波辅助萃取和微波辅助萃取法。再次,研究了酶辅助三液相萃取番茄皮渣中番茄红素和多糖。考察了酶种类及酶解条件对提取的影响。结果表明,2%的果胶酶,在p H 6.0、酶解温度为45 oC条件下酶解90min,番茄红素和多糖分别达到最大值为127.0 mg/100 g和59.8 mg/g。傅里叶红外光谱检测结果显示果胶酶并不能破坏番茄红素的结构。该方法所得到的的番茄红素和多糖的得率均高于酶辅助三溶剂介导萃取和三液相萃取,且具有更好的抗氧化活性。最后,选用大孔树脂对酶辅助三液相的上下相粗提物完成提纯。通过柱层析法对上相粗提物进行纯化;对下相粗提物进行了纯化和结构的初步分析,考察了AB-8和D101两种树脂的脱色效果、Sevage法除蛋白次数、分级沉降和刚果红实验。结果显示,上相粗提物经柱层析纯化后可得到7.8 g番茄红素晶体;下相粗提物经AB-8型大孔树脂脱色、除蛋白反复6次效果最好;在分级沉降实验中P70组分质量最大,且刚果红实验显示番茄多糖具有稳定的三螺旋结构。
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