论文部分内容阅读
目的:本研究主要目的是通过观察在姜黄素干预下体内模型中胶原含量的变化,以及体外模型中TGF-β/Smads信号分子相关蛋白表达的变化。来探讨TGF-β/Smads信号通路在姜黄素改善糖尿病心肌纤维化中的作用。方法:高糖高脂饮食联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素（STZ）35 mg·kg-1建立2型糖尿病大鼠模型,自由饮用300 mg·kg-1·d-1姜黄素进行干预;天狼猩红染色,Masson染色检测各组大鼠心肌内胶原表达情况;免疫荧光、Western Blot法检测各组大鼠心肌内CollagenⅠ和CollagenⅢ蛋白的表达情况。分离提取大鼠乳鼠心肌成纤维细胞;葡萄糖(5.5、20、25、30、35、50 mmol·L-1)刺激大鼠乳鼠心肌成纤维细胞（CFs）24 h确定最佳高糖造模浓度;30 mmol·L-1高糖加姜黄素(10、25、50、100、200μmol·L-1)刺激CFs 24 h确定最佳姜黄素给药浓度;Western blot法检测细胞内CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGF-β1、p-Smad2、Smad2、p-Smad3、Smad3、TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ、TβR-Ⅲ的蛋白表达水平。结果:天狼猩红染色和Masson染色显示,相比于正常组,糖尿病组大鼠心肌组织胶原出现明显沉积,Western blot法显示,与正常对照组相比,糖尿病组大鼠心脏组织中CollagenⅠ和CollagenⅢ蛋白表达明显增多,给予姜黄素治疗后,糖尿病大鼠心肌组织胶原沉积明显减少,心脏组织中CollagenⅠ和CollagenⅢ蛋白的表达明显减少。30 mmol·L-1高糖刺激CFs 24 h可以明显促进细胞增殖（P<0.05）;而10μmol·L-1姜黄素可以明显抑制高糖诱导的CFs增殖（P<0.05）;30 mmol·L-1高糖诱导CFs 24 h以后,CollagenⅠ、CollagenⅢ、TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3、TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ、TβR-Ⅲ的蛋白表达明显增多（P<0.05）,给予25μmol·L-1姜黄素以后,上述各蛋白表达水平明显下降（P<0.05）。结论:姜黄素可以降低糖尿病大鼠心肌胶原的沉积,改善糖尿病大鼠心肌纤维化。姜黄素改善心肌纤维化的作用与抑制TGF-β/Smads信号通路的活化有关。