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芒果(Mangifera indica.L)是热带和亚热带地区广泛种植的水果之一。胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)引起的炭疽病是芒果采后最具破坏性的病害之一。防治采后病害通常采用化学防治措施,但使用传统的化学杀菌剂会残留于水果表面,威胁人体健康和环境安全。生物防治符合国家绿色环保的发展战略,国内外大量研究表明拮抗酵母菌能有效控制采后病害,且能维持果实品质。本文以实验室前期分离得到的美极梅奇酵母(Metschnikowia pulcherrima)为研究对象,研究了美极梅奇酵母(M.pulcherrima)对“台农”芒果炭疽病的防治效果和对芒果果实贮藏品质的影响,同时对芒果炭疽病的抑菌机理进行了探讨。研究结果如下:(1)In-itro(离体实验)研究了美极梅奇酵母对胶孢炭疽菌(C.gloeosporioides)抑菌效果,结果表明:在YPD培养基中美极梅奇酵母能够抑制胶孢炭疽菌(C gloeosporioides)菌丝的生长。在第5天,对照组中菌丝湿重是处理组的38.89倍,对照组菌丝干重是处理组的88.85倍。在低温和常温下测定酵母菌生长动态,25 ℃下酵母菌数量第3天达到峰值,15 ℃下第5天达到峰值。随着酵母菌浓度的升高,对炭疽病的抑制效果先上升后下降,其最佳浓度为108CFU/mL。(2))In-vivo(活体实验)研究了美极梅奇酵母对芒果炭疽病的抑制效果,结果表明:在芒果伤口(人为伤)处接种酵母菌和病原菌,贮藏在15 ℃和25 ℃下,培养12天后抑制率分别达到了 57.81%和78.82%。(3)相较于对照组,七成熟的“台农”芒果用108CFU/mL的酵母菌悬液浸泡处理10min,果实能较好的维持色泽和硬度,且可滴定酸含量、Vc含量,可溶性固形物含量保持较好。(4)营养空间竞争是美极梅奇酵母抑制芒果炭疽病的机理之一。通过添加外源营养物质验证营养竞争,发现美极梅奇酵母能够同胶孢炭疽菌竞争营养物质,快速同化吸收碳水化合物,尤其是葡萄糖;通过接种酵母菌和病原菌时间顺序试验验证空间竞争,发现越早接种酵母菌,病斑直径越小。(5)美极梅奇酵母和胶孢炭疽菌之间存在铁元素竞争,酵母菌优先消耗环境中的铁元素抑制病原菌生长。(6)美极梅奇酵母能够产生生物膜。在扫描电镜下观察到,美极梅奇酵母在芒果表面形成了生物膜,且形成的生物膜在72 h后才开始降解,说明生物膜保持时间较长,短时间不会降解。(7)实验结果表明单独接种美极梅奇酵母和胶孢炭疽菌都可诱导芒果果实中苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、几丁质酶(CHT)、β-1,3葡聚糖酶(GLU)活性增加,但是同时接种两者,其效果并未显著叠加。(8)通过离体和活体试验,发现美极梅奇酵母产生少量非挥发性抑菌物质,但并不足以影响胶孢炭疽菌生长;同时发现美极梅奇酵母产生一定量挥发性抑菌物质,在离体条件下抑菌率为30.71%。GC-MS检测分析,表明挥发性物质大多都是醇类、酸类、酯类、酮类、醛类、酰胺类。(9)美极梅奇酵母可以产生胞外几丁质酶和β-1,3葡聚糖酶,病原菌细胞壁(CWP)组合胶体几丁质诱导产生的几丁质酶活性最高,CWP组合葡萄糖诱导产生的β-1,3葡聚糖酶活性最高。美极梅奇酵母DNA片段进行PCR扩增发现几丁质酶基因核苷酸序列大约在500bp左右。