毕氏酵母中重组人白介素15的表达纯化及其生物学活性鉴定研究

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白介素15 (interleukin-15, IL-15)作为一种炎症因子,与IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-21一样同属4α超螺旋细胞因子家族。人源IL-15位于4号染色体短臂,含8个外显子和5个内含子,成熟IL-15编码114个氨基酸序列,分子量大小为14-15KDa,主要表达于单核细胞、巨噬细胞及树突状细胞中。IL-15主要的生物学功能为诱导T细胞、B细胞和自然杀伤细胞(natural killer cell, NK cell)的分化已及促进T细胞、B细胞和NK细胞的增殖。作为一种多效细胞因子,IL-15在免疫,肿瘤发生,过敏性反应及自身免疫疾病中均发挥着重要作用。在本研究中,我们构建了一种C端带His标签和Myc标签的重组人白介素15 (rhIL-15)的表达载体pPICZaA-Pro-hIL-15-Tag。重组表达载体经转化毕氏酵母表达菌株X-33后,阳性表达菌株rhIL-15表达产量高达75mg/L。X-33菌株表达的rhIL-15经镍离子亲和层析柱、DEAE阴离子交换柱纯化后纯度可达95%。毕氏酵母表达的重组白介素15存在不同程度的N-糖基化修饰形式,其分子量比预测理论分子量偏大。毕氏酵母中表达纯化的rhIL-15可促进小鼠CTLL-2及人NK细胞的增殖,具有良好的生物学活性。
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