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目的观察复方芪藻汤对醋酸诱导型胃溃疡大鼠的治疗作用并通过检测氧化应激相关因子MDA、SOD、GSH-PX的表达及凋亡相关因子Fox03a、Bim的表达来研究其保护胃黏膜的作用机制。方法1.造模:将60只大鼠随机分为正常对照组、溃疡模型组、FFQZT低剂量组(3 g/kg)、FFQZT中剂量组(6 g/kg)、FFQZT高剂量组(12g/kg)与奥美拉唑组(3.6 mg/kg)。采用醋酸烧灼法制备溃疡模型。各组大鼠均以1%戊巴比妥钠进行腹腔麻醉。大鼠麻醉后,仰卧位固定,用弯剪剪去上腹部毛发,暴露手术区域并以碘伏消毒。在剑突下1.5 cm处切开腹部,作一纵形切口,暴露肌层,手术剪沿腹正中线偏左0.5 cm处剪开。用无齿镊探查腹腔,在肝脏后方找到胃后将其轻柔拉出体外。取一滤纸片蘸冰醋酸后贴附在胃前壁窦体交界处,贴附时间为30 s,贴附时要注意避开血管,取下后,取新滤纸片蘸冰醋酸贴附在同一位点,贴附时间仍为30s。用生理盐水冲洗贴附部位,注意切勿使冲洗液流进腹腔内。冲净残留冰醋酸后,用无菌纱布擦干并用大网膜覆盖住贴附部位,将其送回腹内。之后逐层缝合并再次以碘伏消毒。造模后第3日,给药组按上述剂量灌胃,正常组与模型组给予生理盐水,灌胃剂量均为1mL/100g,连续给药14d。2.取材:末次给药后,大鼠禁食12h。以1%戊巴比妥钠行腹腔麻醉,麻醉剂量为2 mL/100g。麻醉后仰卧位固定大鼠,经腹主动脉取血,3000 rpm离心10min,收集上清液,分装,-80℃保存。将大鼠胃部沿胃大弯剪开,用冰盐水冲洗胃腔后,展平放置在冰袋上,观察胃壁形态并拍照。用游标卡尺测量溃疡灶最大直径及宽径。将溃疡灶均分两份,分别以4%多聚甲醛浸泡和-80℃保存。3.检测指标:采用TBA法测定血清中MDA含量;采用WST-1法测定血清中SOD活性;采用比色法测定血清GSH-PX活力。采用免疫组化法与Western blotting测定Fox03a、Bim蛋白表达量;采用TUNEL法测定胃黏膜上皮细胞凋亡率。结果1.胃组织大体观:正常组大鼠胃黏膜光滑,黏膜皱襞自然走行,无充血、无肿胀,呈粉红色。模型组大鼠胃黏膜上可见四周隆起、中心凹陷的类圆形溃疡灶,其边界清楚、灶中心被覆白苔、触感略硬,黏膜颜色较正常组略显苍白。随着药物的应用,溃疡灶面积明显减小,充血水肿程度减弱、凹陷深度减轻、隆起皱裝渐平。FFQZT高剂量组与奥美拉唑组溃疡灶几近消失,溃疡累及皱襞恢复正常走行。2.溃疡指数与溃疡抑制率:与模型组相比,FFQZT各组及奥美拉唑组UI均明显降低(P<0.01)。与奥美拉唑组相比,FFQZT高剂量组溃疡抑制率更高(P<0.01),低剂量组差异没有统计学意义(P>0.05)。3.氧化应激指标检测结果:与正常组相比,模型组MDA含量增多、SOD活力下降、GSH-PX活力下降(P<0.01);与模型组相比,FFQZT中、高剂量组MDA含量减少(P<0.01)、GSH-PX活力增高、SOD活力增高(P<0.05);与奥美拉唑组相比,FFQZT中、高剂量组GSH-PX活力增高,差异有统计学意义(P<0.05),FFQZT各组MDA含量与SOD活力差异不明显(P>0.05)。4.免疫组化结果:Fox03a主要表达于细胞核,Bim主要表达于细胞浆。正常组Fox03a、Bim阳性表达少、染色程度浅;溃疡组Fox03a、Bim阳性表达明显增多、染色程度深;FFQZT各剂量组及奥美拉唑组Fox03a、Bim表达均有不同程度减少;与溃疡模型组相比,FFQZT高剂量组Fox03a、Bim表达减少更为显著(P<0.01)。5.Western blotting结果:与正常组相比,模型组中Fox03a、Bim蛋白表达量均明显增多(P<0.01);与模型组相比,FFQZT各组与奥美拉唑组Fox03a蛋白表达量明显减少(P<0.01),FFQZT高剂量组Bim表达减少显著(P<0.01),FFQZT低、中剂量组Bim差异没有统计学意义(P>0.05)。6.TUNEL结果:与正常组相比,模型组细胞凋亡率显著增高(P<0.01);与模型组相比,FFQZT各组及奥美拉唑组细胞凋亡率均有不同程度的减少(P<0.01);与奥美拉唑组相比,FFQZT高剂量组细胞凋亡率减少更为显著(P<0.01),FFQZT中剂量组细胞凋亡率变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论1.复方芪藻汤对醋酸型大鼠胃溃疡具有良好的治疗作用。2.胃溃疡的形成有氧化应激的参与,复方芪藻汤能够通过降低MDA含量、提高SOD、GSH-PX活性,抵抗氧化应激,从而发挥其抗溃疡的作用。3.胃溃疡的形成有细胞凋亡的参与,复方芪藻汤可能通过调节FoxO3a、Bim蛋白表达,抑制胃黏膜上皮细胞凋亡,从而发挥其抗溃疡的作用。