油菜是我国最重要的油料作物之一,菜籽油占年产食用油的40%。随着人们生活水平的提高,对菜籽油的品质要求提高。高油酸含量的菜籽油被认为是有利于人们身体健康的,且高油酸油在医疗,工业,日常生活等很多方面显示出具大优势,因此提高油菜籽中油酸含量是目前油菜品质育种的重要方向。本文主要是从进一步探索油酸相关基因功能为出发点,以基因工程技术为主要手段,根据RNA干扰原理,从本实验室构建的油菜油酸突变体差减文库中挑选2个基因片段(经RT-PCR分析发现其在高油酸材料和低油酸材料中具有不同的表达模式),构建RNA干扰载体,用农杆菌介导法转化甘蓝型油菜湘油15。1.设计引物从甘蓝型油菜湘油15的叶片DNA中扩增两个目的片段B34和B55。两个片段都分别正向和反向插入带有NapinA启动子的pFGC5941.Na载体,构建出两个RNA干扰载体PFGC5941.Na-34和pFGC5941.Na-55。2.干扰载体转入农杆菌,选择油菜试管苗的带柄子叶为外植体,侵染农杆菌进行转化,用PPT对侵染后诱导出的不定芽进行抗性筛选,得到的筛选最适浓度是1.8‰,并得到9株抗PPT抗性苗。