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目的:研究CSPG4对上皮性卵巢癌细胞增殖与迁移的能力的影响,探讨CSPG4的表达对其相关致癌信号通路的活化作用。方法:1.利用Western Blot实验确定CSPG4在几种人类卵巢癌细胞系如HEY,A2780,MA-148和OVCAR-3细胞系中的蛋白表达情况。利用细胞转染技术构建CSPG4稳定干扰及其空载体细胞系(HEY sh RNA-CSPG4及HEY sh RNA-control细胞),使用这些配对的细胞系进行体外功能实验。包括:用MTT法及软琼脂克隆形成实验检测细胞增殖的能力,平板划痕实验检测细胞迁移的能力。明确CSPG4基因在上皮性卵巢癌细胞增殖与迁移中的重要性。2.确定CSPG4的表达对CSPG4相关致瘤信号通路的影响。相关通路标志物为:c-Met,Akt,ERK1/2。干扰c-Met,将用于初步确定其作为CSPG4下游效应因子的潜在重要性。结果:1.CSPG4在HEY、OVCAR-3、A2780和MA-148中的蛋白表达明显高于Sk OV3、OVCAR-5。Western Blot结果显示:HEY、OVCAR-3、A2780和MA-148为CSPG4的阳性表达细胞系,Sk OV3、OVCAR-5为阴性表达细胞系。2.免疫荧光检测显示CSPG4在卵巢癌MA-148、HEY、A2780细胞系中均表现为高表达。且CSPG4在不同的上皮性卵巢癌细胞系中主要位于细胞膜上。3.MTT法显示HEY sh RNA-CSPG4细胞较HEY sh RNA-control相比生长明显受到抑制,两者差异有显著统计学意义(P<0.05)。4.软琼脂克隆形成实验显示HEY sh RNA-control组形成集落数量明显多于HEY sh RNA-CSPG4组,两者克隆形成数量差异有明显统计学意义(P<0.01)。5.平板划痕实验显示在24h时,HEY sh RNA-control细胞的划痕已经完全愈合,而HEY sh RNA-CSPG4细胞仍然存在比较明显的间隙,两者之间有显著差异(P<0.01)。6.从蛋白水平显示sh RNA-CSPG4转染的HEY细胞中p-c-Met、p-ERK1/2、ERK1/2的蛋白表达弱于其在sh RNA-control对照组,而p-Akt在两组中的蛋白表达无明显差异。7.在上皮性卵巢癌HEY细胞中,从蛋白水平显示通过sh RNA减少c-Met表达,c-Met、p-c-Met、p-ERK1/2蛋白表达均比其对照组弱,而p-Akt及Akt蛋白表达变化不明显。结论:1.抑制CSPG4的表达可以抑制上皮性卵巢癌细胞增殖及迁移的能力。2.CSPG4可能通过c-Met和ERK1/2信号通路途径促进上皮性卵巢癌的发展。