猕猴桃果肉花青苷积累相关MYB转录因子的克隆及表达分析

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红肉猕猴桃果心部位色彩艳丽,果肉口感香甜清爽,营养价值特别丰富,因此在市场上深受消费者的喜爱。‘红阳’(Actinidia chinesis cv‘Hongyang’)是红肉猕猴桃里最具代表性的品种,红色是‘红阳’猕猴桃吸引消费者的关键特性。为初步了解不同肉色猕猴桃果实花青苷积累差异的机理,本研究以红肉品种‘红阳’、和绿肉品种‘华特’(Actinidia eriantha Benth)为试验材料,分析了不同果实发育时期花青苷含量及MYB转录因子基因的表达变化,主要结果如下:利用高效液相色谱法(HPLC)检测‘红阳’、‘华特’猕猴桃果实不同发育时期果实花青苷的含量差异,随着果实发育进程,‘红阳’猕猴桃花青苷含量呈上升趋势,而‘华特’猕猴桃花青苷含量一直保持相对较低水平;在果实相同发育时期,‘红阳’猕猴桃花青苷的含量显著高于‘华特’猕猴桃,在成熟期相差将近44倍。利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)结合快速扩增末端(RACE)技术分别克隆了‘红阳’、‘华特’猕猴桃MYB转录因子的全长cDNA,命名为HYAcMYB和WtAeMYB,序列比较分析发现在3’UTR区HYAcMYB比WtAeMYB长67bp;利用Real-time PCR技术分析HYAcMYB和WtAeMYB在‘红阳’和‘华特’猕猴桃果实不同发育时期表达调控,结果表明,HYAcMYB的表达变化趋势与‘红阳’猕猴桃花青苷含量变化趋势基本一致,AcMYB在‘红阳’猕猴桃发育过程中表达显著高于‘华特’猕猴桃,在花后65d,HYAcMYB的表达量将近是WtAeMYB的9倍。因此,结合果实花青苷积累规律以及AcMYB表达调控特性,推测MYB转录因子基因在猕猴桃果肉花青苷调控途径中可能发挥了重要的作用,具体行使的功能还需本研究后续的深入和结合结构基因的克隆表达结果来分析。
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