环指蛋白10对高糖诱导下血管平滑肌细胞功能的影响

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目的:探讨RNF10对高糖诱导下血管平滑肌细胞功能的作用机制。方法:模拟代谢综合征血管再狭窄的模型,体外采用高糖(4.5g/L)培养基诱导血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSMCs)过度增殖及细胞外基质沉积的病理状态。根据不同培养基及腺病毒转染情况,共分为4组:空白对照组(Control group);高糖组(High Glucose,HG group);高糖+病毒空载体组(HG+Ad-GFP group);高糖+过表达RNF10组(HG+Ad-RNF10 group)。荧光显微镜下定性分析VSMCs腺病毒转染效果;CCK-8和EdU检测VSMCs的增殖率;流式细胞仪检测VSMCs的周期分布;Western blot定量分析VSMCs的RNF10、CyclinD1和CDK4的蛋白表达;qPCR定量分析VSMCs的MMP-2和TIMP-2 mRNA的表达。结果:(1)RNF10显著抑制高糖诱导下VSMCs的增殖率(P<0.05);(2)RNF10显著抑制高糖诱导下VSMCs的周期从G0-G1期到S期的转化(P<0.05);(3)RNF10显著抑制高糖诱导下VSMCs的周期蛋白CyclinD1和CDK4的表达(P<0.05);(4)RNF10显著促进MMP-2和TIMP-2的转录水平(均P<0.05),且促进TIMP-2 mRNA更为明显,最终导致显著降低MMP-2/TIMP-2(P<0.05)。结论:RNF10可明显改善高糖诱导下VSMCs的功能,其机制可能与抑制VSMCs增殖反应和细胞外基质沉积有关。
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