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色素在食品中大量使用,其目的主要是改善食品的感官性状,提高消费者的食欲,是现代食品工业不可或缺的组成部分。由于合成色素价格低廉、着色力优秀,近年来食品中广泛使用。GB2760-2011中允许食品中使用的人工合成色素包含赤藓红、柠檬黄、亮蓝、靛蓝、苋菜红、胭脂红、诱惑红、日落黄、新红、偶氮玉红等多种,明确规定禁止添加一切工业染料。工业染料大部分是偶氮类化合物,被证实对人体具有一定程度致畸、致癌、致突变等危害性。然而食品厂家为了追求更大利益,近年来食品中违法添加工业染料的安全事件频发,苏丹红、罗丹明B、酸性橙、碱性橙、分散类染料等非法添加事件屡禁不止。直接红染料是一类人工合成的鲜红色偶氮化合物,一般用于工业染色、医学临床诊断、生物染色剂及化学指示剂等方面。然而研究发现其对人体具有一定的致癌性,因此很多国家严格禁止在食品中作为着色剂使用。由于苏丹红、罗丹明B、碱性橙这几类染料的检测方法已比较成熟,其它红色类如直接红Ⅱ、刚果红等直接红染料价格便宜,使用比较广泛,极易被厂商非法使用,因此有必要建立一种灵敏、准确、快速的检测食品中非法添加直接红染料的方法。本文重点为食品中直接红类染料的检测方法研究,采用固相萃取-超高效液相色谱方法定性定量分析食品中直接红染料以及最常见的红、黄色合成色素,取得了较为满意的结果。1.建立了食品中直接红染料的固相萃取-超高效液相色谱分析方法。含油样品经石油醚脱脂后,采用氨水:乙醇=30:70(V/V)提取剂,超声加热辅助提取3次,并结合HLB柱酸性上样,碱性甲醇洗脱净化。氮气吹干后定容,过0.22μmPTFE膜后上机测定。葡萄酒样品采用乙腈/水-氯化钠分层体系提取2次,合并乙腈层定容后过滤膜上机。使用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(50mmx2.1mm,1.7μm),流动相:A为乙腈,B为10mmol/mL的乙酸钱水溶液,梯度洗脱。流速:0.4mL/min检测波长:498nm,柱温:20℃。直接红染料的回收率为72.1%~96.6%,直接红Ⅱ和刚果红的检出限分别为0.041mg/kg、0.029mg/kg,相对标准偏差为2.16%~5.97%(RSN=6),线性方程相关系数均达到0.9999。2.研究证明本文建立的直接红染料的固相萃取-超高效液相色谱分析方法也适用其他常见红、黄色合成色素的检测。实验结果表明红2G、苋菜红、胭脂红、日落黄、赤藓红五种常见人工合成色素均能在此条件下4min中内出峰,分离度良好。线性方程相关系数在0.9993-0.9999范围内,回收率为86.2%~95.1%,苋菜红、胭脂红、日落黄、红2G、赤藓红的最低检测限(LOD)分别为0.026mg/kg、0.025mg/kg、0.019mg/kg、0.020mg/kg、0.038mg/kg,相对标准偏差为1.90%~3.11%(RSN=6)。该方法灵敏度高,出峰时间较短,能快速、简便的测定食品中的合成色素,得到了较满意的结果。3.采用建立的固相萃取-超高效液相色谱分析方法检测了某市随机抽取的市售食品样品163份,统计分析了食品中直接红染料和常见合成色素的添加情况。常见的合成着色剂检出率为13.6%,均未超过国家标准允许添加量,所有样品中均未检出直接红染料,表明目前某市市售食品中还没有发现非法添加直接红染料的情况。