香菇多糖提取工艺优化与高效液相色谱指纹图谱分析

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香菇多糖不但有多重的药理活性,如抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、降血糖和抗氧化等,而且毒性低适合长期服用。目前香菇多糖提取的研究一直是一个热点问题,提取的方法层出不穷。常用的提取方法有传统热水回流法、稀酸法、稀碱法、超声法和微波辅助法等。不同的提取方法提取率各不相同,提取工艺的优缺点各异。大多数学者和企业都把焦点集中在多糖的提取率上,而提取出来的香菇多糖组成结构是否相同、功效是否一致则甚少人深入考察。本文第二章通过单因素考察料液比、提取温度、提取时间、提取次数对传统热水回流提取法多糖提取率的影响,得到最佳工艺为料液比1:30、提取温度为90℃,两级错流提取。第1级提取60min,第2级提取30min。同样地通过单因素考察得到稀碱提取法最佳工艺为提取液pH值为10,料液比1:30,提取温度为90℃,两级错流提取。第1级提取60min,第2级别提取30min。超声提取最佳工艺为料液比为1:30,超声频率为300W,超声温度为30℃。本文第三章首次提出稀醇碱提取法提取香菇多糖。由于适量的乙醇能浸润细胞,乙醇的存在引起膜透性(相对电导率)的增加和膜质过氧化程度的加剧。因此细胞壁内的香菇多糖更容易溶解到提取液中。通过单因素考察得到最佳提取工艺为提取液乙醇浓度为3%、pH值为10,料液比1:30,提取温度为90℃,两级错流提取。第1级提取60min,第2级提取30min。提取率约为14.5%。稀醇碱提取法提取率是传统热水回流提取的1.20倍,稀碱提取的1.16倍,超声提取的1.46倍。本文第四章优化香菇多糖高效液色谱指纹图谱的实验步骤,并对热水回流提取法、稀碱法、稀醇碱法和超声法的指纹图谱进行对比分析。结果表明醇碱提取与热水回流提取的香菇多糖具有相似的指纹图谱,香菇多糖中各单糖比例基本一致。而且稀醇碱提取法保留了传统热水回流提取设备简单、工艺实操性强,成本低等优点,而且把提取率提高了20%。可推广到保健品企业和药品企业的香菇多糖的工业化大生产当中。
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