枳壳枳实药材品质动态分析研究

来源 :江西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yanrj
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枳壳作为江西省的道地药材,与其他产区所产枳壳相比,质量稳定、品质好,疗效佳。枳壳和枳实两者基源相同,但在不同的生长阶段表现出相似而又不同的成分特征和临床效果,因此在中国药典中被列为两种不同的药材。不同种类、不同地区、不同生态环境,药材采收指标存在差异。近年来,随着枳壳药材需求量增加、野生资源短缺,造成了枳壳无序开发、品种创新不足、质量安全水平不高等问题,影响中医药绿色健康发展。因此,本文利用指纹图谱和成分分析来优选出产区(地),再探究这一产区(地)、不同时间段的枳实成分的动态变化,来确定枳实的最佳采收期,并对药效物质基础进行探究。1.枳壳产地研究(1)枳壳产地对比研究采用HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法,结合化学模式识别技术,对枳壳进行质量评价研究。建立了枳壳药材指纹图谱,共标定17个共有峰,24批药材相似度为0.965~0.998,通过偏最小二乘判别分析筛选出VIP值>1的7种标志性化合物,对鉴定出来的色谱峰进行含量测定,通过综合评分方法得到最优产区是江西省,江西省最优产地是江西省樟树吴城。(2)枳壳非挥发性成分研究样品采用70%的甲醇超声提取,应用UPLC-Q-TOF-MS,进行正负离子扫描,共鉴定了30个化合物,大多数是黄酮类成分。(3)枳壳挥发性成分研究采用GC-MS对江西、重庆、湖南、浙江枳壳的挥发油进行检测,共鉴出24个化学成分。其中柠檬烯、γ-松油烯、芳樟醇含量占比高。(4)枳壳挥发油治疗功能性消化不良的网络药理学作用机制探讨采用网络药理学对枳壳挥发油活性成分治疗功能性消化不良(FD)的作用,在Genecard等数据库,以枳壳挥发油成分>1%为活性成分,预测治疗功能性消化不良的潜在相关靶点,构建PPI,筛选核心基因,构建枳壳挥发油治疗FD的通路图,结果表明枳壳挥发油是多靶点多通路的来治疗FD。2.枳实最佳采收期(1)枳实指纹图谱研究利用HPLC建立4个产地24批枳实样品的指纹图谱,共标定17个共有峰,指认出7个特征峰,24批药材相似度均大于0.930,可为枳实药材质量标准提供科学依据。(2)枳实非挥发成分分析样品采用70%的甲醇超声提取,应用UPLC-Q-TOF-MS,进行正负离子扫描,共鉴22个化合物,黄酮类最多,少量生物碱类、香豆素类和柠檬苦素类。(3)枳实挥发性成分研究采用GC-MS对江西、重庆、湖南、浙江枳实挥发油进行检测,共鉴出27个化学成分。其中枳实挥发油中D-柠檬烯、γ-松油烯、芳樟醇、4-萜烯醇、β-蒎烯含量占比高。(4)枳实挥发油治疗功能性消化不良的网络药理学作用机制探讨采用网络药理学对枳实挥发油活性成分治疗功能性消化不良(FD)的作用,在Genecard等数据库,以枳实挥发油成分>1%为活性成分,预测治疗功能性消化不良的潜在相关靶点,构建PPI,筛选核心基因,构建枳实挥发油治疗FD的通路图,结果表明枳实挥发油是多靶点多通路的来治疗FD。(5)枳实最佳采收期利用HPLC建立了不同采收期的枳实指纹图谱,确定了指纹图谱中的7个特征色谱峰,再利用化学模式进行分析,筛选VIP值>1的色谱峰,对鉴定出来的色谱峰和辛弗林进行含量测定。按中国药典规定枳实“辛弗林≥0.3%和直径0.5-2.5cm”结合含量测定结果和果径大小,确定江西抚州地区枳实采收期为5月29日到6月26日。按中国药典规定枳壳“柚皮苷≥4.0%,新橙皮苷≥3.0%和直径3~5cm”,结合含量测定结果和果径大小,可以确定江西抚州地区枳壳采收期为7月3日到7月24日。
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