本研究分为四部分： 第一章：肺泡II型上皮细胞的原代培养及鉴定 目的：探讨胎鼠肺泡II型上皮细胞(AECII)分离、纯化及鉴定的方法。 方法：先后采用胰蛋白酶及IV型胶原酶消化肺组织，并用IgG包被瓶免疫吸附方法进行纯化。用电子显微镜及激光共聚焦显微镜进行细胞鉴定。 结论：胰蛋白酶加胶原酶消化、IgG包被瓶进行筛选所得AECII的活力及纯度均较高，可以作为AECII原代培养的常规方法；电镜和免疫荧光均可达到鉴定目的。 第二章：肺泡II型上皮细胞的生长状况及其转分化的鉴定 目的：观察AECII体外培养的生长状况及转分化过程。 方法：将细胞随机分为2天、4天、6天、8天时间点，利用倒置显微镜观察细胞生长情况，记录细胞数目，绘制生长曲线；台盼兰据染法观察细胞活力；利用流式细胞仪观察细胞生长周期和细胞凋亡情况；电子显微镜观察细胞超微结构；采用免疫荧光技术，共聚焦显微镜观察SP-C、水通道蛋白5(AQP5)的阳性表达；RT-PCR观察SP-C、AQP5mRNA的表达情况。 结论：原代培养的AECII在培养早期增殖能力最强，细胞增殖分化能力在培养晚期减低。体外培养的AECII有向AECI转分化的能力。 第三章：高氧对肺泡II型上皮细胞生长状况及转分化的影响 目的：观察高氧对肺泡II型上皮细胞生长状况及转分化的影响。 方法：将细胞随机分为空气组与高氧组，空气组置于5％CO2的培养箱中培养，高氧组置于5％CO2-95％O2的混合气中培养。利用共聚焦显微镜活细胞工作站观察钙离子动态变化，5％CO2-95％O2混合气流量为3L/min，其余方法同第二章。 结论：高氧对AECII的增殖能力、细胞周期具有明显的抑制作用，对细胞凋亡有促进作用。高氧在一定程度上促进AECII的转分化，但高氧对AECII的损伤作用大于其促分化作用。 第四章：KGF对肺泡II型上皮细胞生长状况及转分化的影响 目的：观察KGF对肺泡II型上皮细胞生长状况及转分化的影响。 方法：将细胞随机分为空气组与KGF组，KGF组细胞按照10ng/ml的标准加入KGF，余方法同第二章。 结论：KGF对AECII的生长增殖能力有明显促进作用，对细胞凋亡有抑制作用，并可以促进AECII转分化能力，同时它可以使AECI逆转为AECII。