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抗菌肽是生物体内诱导表达具有广谱抗菌活性的小分子多肽。这些多肽是生物体非专一性的免疫应答产物，是生物体内免疫系统的重要成分。目前国内关于猪源抗菌肽的研究，主要针对于猪的小肠中的抗菌肽，而猪血中抗菌肽的提取及抗菌活性研究在国外虽已有少量报道，在国内却未见报道。由于猪血液中白细胞是免疫系统中起主要作用的免疫细胞，而其中性粒细胞约占白细胞总量的70％，从猪血液中性粒细胞中分离提取抗菌肽也就比较合理。因此本实验采用从猪血液中性粒细胞中分离提取小分子多肽，根据小分子多肽抗菌活性特点进而分离鉴定出抗菌多肽。同时，通过优化提取工艺，提高抗菌肽的得率和含量。1．提取部分本实验以新鲜猪血中性粒细胞中的活性小分子多肽为研究对象，取新鲜猪血抗凝、离心，再经超声波处理、乙酸浸提，又经葡聚糖凝胶Sephadex G25、Sephadex G100的过滤层析，超滤装置分离20KD以下的小分子多肽，并将每一步收集的组分测定其抗菌活性，收集具有抗菌活性的部分。将具有活性的组分进行Tricine SDS-PAGE电泳，分析获得两条主带，分子量分别约为6KD和15KD。再做AU-PAGE电泳，获得的胶使用凝胶覆盖测定法测定两条主带的抗菌活性，最终确定分子量约为6KD的小分子多肽具有抗菌活性。2．抑菌试验部分鉴于现在已知的抗菌肽大多只在体外具有抗菌活性，而在动物体内几乎没有活性，本实验只进行了体外抗菌活性试验。为确定抗菌肽具有广谱抗菌活性的特点，本实验针对多种不同性质的菌株进行了抗菌活性测定。结果表明，本实验所获得的抗菌肽对这些菌株均具有抗菌活性。其中对大肠杆菌质控株ATCC25922抗菌活性最好，最低抑菌浓度达到300μg／ml；对李氏杆菌ATCC54004的抑菌效果最差，最低抑菌浓度为975μg／ml，由此初步确定了抗菌肽的广谱抗菌活性。