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大豆作为一种重要的经济作物和油料作物,是植物蛋白和油脂的重要来源,在我国广泛种植。通过基因工程技术改良大豆目标性状是一种快速、有效的途径,也是现代生物技术在育种研究中的具体应用。但是大豆是公认的难转化的作物之一,其再生体系和遗传转化的研究相对其它作物而言更为困难,因为大豆组织培养再生困难,可重复性差,基因型之间差异大,其遗传转化技术体系还不完善等。因此,建立稳定高效的大豆转化技术体系,是目前急需解决的关键问题之一。
农杆菌介导的转化方法是植物基因工程中最常用的方法之一,在利用农杆菌介导的遗传转化技术中,有许多因素对转化效率和转基因植株的再生都会产生重要影响,对这些影响因素进行研究具有实际意义。本实验通过研究大豆子叶节器官发生途径的再生系统和对激素配比和受体基因型的筛选,找到了适宜的激素浓度配比和再生频率较高的基因型。同时对大豆种子灭菌方法、卡那霉素(Kan)浓度、头孢噻肟钠(Cef)等主要因素进行梯度比较实验,确定最佳配比,初步建立了适宜农杆菌遗传转化的高效受体系统,并在此基础上采用农杆菌介导的大豆子叶节转化系统将新克隆的热激转录因子(heat Shock factor,Hsj~)基因转入大豆,得到了一批转基因植株,PCR检测证实,外源基因已整合到受体大豆基因组中。