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小麦叶锈菌(Puccinia triticina)引起的叶锈病在小麦各种植区十分常见,导致各国家小麦减产。小麦叶锈菌新的生理小种出现和发展、毒性频率变化、小种对环境适应能力增强等是造成寄主植株丧失去抗性的主要原因。研究叶锈菌地区和年份间遗传变化可以揭示小麦叶锈菌毒性变化,对抗病品种的选择和合理布局有重要意义。本研究通过毒性鉴定和SSR分子标记技术分析了新疆177个小麦叶锈菌单孢子堆菌株的遗传结构,结果如下:
1.根据16个固定鉴别寄主上供试菌株不同的反应型,将177个菌株划分为52致病类型,其中THTT和THTS(37.29%、18.64%)为优势致病类型。通过MEGA6软件对毒性多样性进行聚类分析,发现叶锈菌群体V5组包含新疆44.07%的菌株,V1组仅包含部分伊宁菌株,占伊宁地区总菌株的39.40%,说明该地区小麦叶锈菌群体毒性结构与其他地区差异较大。2009年菌株主要集中在V4和V5两组,2013年菌株主要集中在V5组,2014年菌株主要集中在V2组,而2007年菌株单独分聚在不同组,说明2007年菌株毒性结构与其他三年差异较大。
2.利用25对SSR引物分析177个新疆小麦叶锈菌的遗传多样性,RB26无多态性位点,其余24对引物共检测出143个位点,其中多态性位点数94,多态性百分率为65.73%。通过对遗传多样性进行聚类分析,菌株间遗传相似系数为0.48-1.00,除1株石河子菌株SHZ44-PHQT13,其余176个菌株可以聚为6组。昌吉菌株均匀分布在S1-1和S1-2,石河子菌株主要集中在S1-2,乌鲁木齐菌株主要聚在S1-2和S1-4,而伊宁菌株主要聚在S1-5,说明小麦叶锈菌的分子遗传结构与地理差异有关。2007年菌株主要集中在S1-1,2009年菌株主要集中在S1-2,2013年菌株分布在S1-1、S1-2和S1-5,2014年菌株主要集中在S1-4和S1-5,说明小麦叶锈菌的分子遗传结构与年份有一定相关性。
3.对两个优势致病类型(THTT和THTS)的99个叶锈菌株进行毒性多样性聚类分析和SSR多态性聚类分析,相似系数分别为0.79-1.00,0.64-0.95,说明两个优势致病类型的毒性和SSR多态性均较为丰富。聚类结果表明,致病类型的聚类结果与毒性多态性相关,而与SSR多态性不相关。
4.分析新疆小麦叶锈菌种群亲缘关系,在物种水平上,H为0.27,I为0.42,Na为2.00,Ne为1.44,P为100.00%,表明新疆小麦叶锈菌遗传多样性丰富。不同地区遗传多样性由高到低的群体是石河子、乌鲁木齐、伊宁和昌吉。4个地区群体间的遗传距离(D)范围为0.0140-0.1548。系统进化分析表明,石河子和乌鲁木齐亲缘关系最近,而昌吉与伊宁群体亲缘关系较远。不同年份遗传多样性由高到低的群体是2013年、2009年、2014年和2007年。4个年份群体间的遗传距离(D)范围为0.0331-0.1560。系统进化分析表明,2013年菌株和2014年菌株间遗传分化最小,2007年菌株和2014年菌株间遗传分化最大,表明群体间相差时间越长,遗传差异越大。
5.新疆小麦叶锈菌群地区间变异,区域内和区域之间均存在遗传分化,区域内的遗传变异占总变异的89.44%,表明叶锈菌遗传变异主要是区域内部。新疆各地区叶锈菌群体间基因流强度为2.83>1,表明新疆各地区叶锈菌种群之间存在一定的基因流。但在4个区域中,昌吉和伊宁群体间的基因流最弱为1.706,两地区间基因交流少,石河子和乌鲁木齐群体间基因流最强(25.37),两地间叶锈菌群体间遗传分化程度较低。
6.新疆小麦叶锈菌年份间变异,年份内和年份之间均发生遗传分化,年份内的遗传变异占总数的88.70%,表明遗传变异主要来源于年份内部。新疆各年份叶锈菌群体间基因流强度为2.28>1,表明新疆各年份叶锈菌种群之间均存在一定的基因流。2007年和2014年群体间的基因流动最弱为1.62,而2013年和2014年群体间基因流的强度最强为9.92,表明随着年份跨度越大,小麦叶锈菌群会发生较大的变化。
1.根据16个固定鉴别寄主上供试菌株不同的反应型,将177个菌株划分为52致病类型,其中THTT和THTS(37.29%、18.64%)为优势致病类型。通过MEGA6软件对毒性多样性进行聚类分析,发现叶锈菌群体V5组包含新疆44.07%的菌株,V1组仅包含部分伊宁菌株,占伊宁地区总菌株的39.40%,说明该地区小麦叶锈菌群体毒性结构与其他地区差异较大。2009年菌株主要集中在V4和V5两组,2013年菌株主要集中在V5组,2014年菌株主要集中在V2组,而2007年菌株单独分聚在不同组,说明2007年菌株毒性结构与其他三年差异较大。
2.利用25对SSR引物分析177个新疆小麦叶锈菌的遗传多样性,RB26无多态性位点,其余24对引物共检测出143个位点,其中多态性位点数94,多态性百分率为65.73%。通过对遗传多样性进行聚类分析,菌株间遗传相似系数为0.48-1.00,除1株石河子菌株SHZ44-PHQT13,其余176个菌株可以聚为6组。昌吉菌株均匀分布在S1-1和S1-2,石河子菌株主要集中在S1-2,乌鲁木齐菌株主要聚在S1-2和S1-4,而伊宁菌株主要聚在S1-5,说明小麦叶锈菌的分子遗传结构与地理差异有关。2007年菌株主要集中在S1-1,2009年菌株主要集中在S1-2,2013年菌株分布在S1-1、S1-2和S1-5,2014年菌株主要集中在S1-4和S1-5,说明小麦叶锈菌的分子遗传结构与年份有一定相关性。
3.对两个优势致病类型(THTT和THTS)的99个叶锈菌株进行毒性多样性聚类分析和SSR多态性聚类分析,相似系数分别为0.79-1.00,0.64-0.95,说明两个优势致病类型的毒性和SSR多态性均较为丰富。聚类结果表明,致病类型的聚类结果与毒性多态性相关,而与SSR多态性不相关。
4.分析新疆小麦叶锈菌种群亲缘关系,在物种水平上,H为0.27,I为0.42,Na为2.00,Ne为1.44,P为100.00%,表明新疆小麦叶锈菌遗传多样性丰富。不同地区遗传多样性由高到低的群体是石河子、乌鲁木齐、伊宁和昌吉。4个地区群体间的遗传距离(D)范围为0.0140-0.1548。系统进化分析表明,石河子和乌鲁木齐亲缘关系最近,而昌吉与伊宁群体亲缘关系较远。不同年份遗传多样性由高到低的群体是2013年、2009年、2014年和2007年。4个年份群体间的遗传距离(D)范围为0.0331-0.1560。系统进化分析表明,2013年菌株和2014年菌株间遗传分化最小,2007年菌株和2014年菌株间遗传分化最大,表明群体间相差时间越长,遗传差异越大。
5.新疆小麦叶锈菌群地区间变异,区域内和区域之间均存在遗传分化,区域内的遗传变异占总变异的89.44%,表明叶锈菌遗传变异主要是区域内部。新疆各地区叶锈菌群体间基因流强度为2.83>1,表明新疆各地区叶锈菌种群之间存在一定的基因流。但在4个区域中,昌吉和伊宁群体间的基因流最弱为1.706,两地区间基因交流少,石河子和乌鲁木齐群体间基因流最强(25.37),两地间叶锈菌群体间遗传分化程度较低。
6.新疆小麦叶锈菌年份间变异,年份内和年份之间均发生遗传分化,年份内的遗传变异占总数的88.70%,表明遗传变异主要来源于年份内部。新疆各年份叶锈菌群体间基因流强度为2.28>1,表明新疆各年份叶锈菌种群之间均存在一定的基因流。2007年和2014年群体间的基因流动最弱为1.62,而2013年和2014年群体间基因流的强度最强为9.92,表明随着年份跨度越大,小麦叶锈菌群会发生较大的变化。