骨髓间质干细胞与胶原重建兔跟腱的组织工程研究

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目的:1.分离、培养、鉴定兔骨髓间质干细胞,并观察该细胞的生物学特性,为将其用于组织工程提供实验基础.2.研究胶原—聚羟基乙酸与骨髓间质干细胞的细胞相容性,为构建组织工程化肌腱提供实验基础.3.探讨用组织工程学原理和方法重建兔跟腱的可行性.方法:1.以全骨髓法分离、培养兔骨髓间质干细胞,并进行鉴定和传代培养,测定其生长曲线、分裂指数及贴壁率.2.将培养的骨髓间质干细胞置入含胶原—聚羟基乙酸的DMEM培基中培养,设为实验组;将骨髓间质干细胞按常规培养置入纯DMEM培基中培养,设为对照组.比较两组细胞的活性和生长情况,并对实验组进行超微结构观察.3.以分离、培养的自体骨髓间质干细胞为种子细胞,以胶原—聚羟基乙酸为支架,在体外混合培养后回植至兔跟腱缺损处,设为实验组.对照组以不含细胞的胶原—聚羟基乙酸支架修复肌腱缺损.于术后4、8、12周取术处新生组织进行大体、组织细胞学观察,并取术后12周时的新生组织做Ⅰ型和Ⅲ型胶原免疫组化染色.结论:1.骨髓间质干细胞可作为种子细胞应用于组织工程.2.骨髓间质干细胞与胶原—聚羟基乙酸的细胞相容性好.以骨髓间质干细胞为种子细胞,以胶原—聚羟基乙酸为支架可在体外预构组织工程化肌腱.3.以自体骨髓间质干细胞为种子细胞、以胶原—聚羟基乙酸为支架构建组织工程化肌腱可以修复肌腱缺损.
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