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目的系膜增生性肾小球肾炎(Mesangial proliferative glomerulonephritis, MsPGN)为临床上常见的慢性肾小球肾炎病理类型,病情迁延难治,预后较差。机体免疫功能紊乱,炎症浸润以及系膜细胞过度增殖与本病的发展密切相关。磷脂酰肌醇3-激酶／蛋白激酶B(PI3K/AKT)是细胞中重要的信号转导通路,广泛参与细胞的增殖、分化、凋亡以及炎症的发生等多种功能,对MsPGN疾病的发生发展具有重要的调控作用。白芍总苷(Total glucosides of paeonia, TGP)是白芍中的一组糖苷类成分,具有免疫调节和抗炎的作用,近年来被广泛的应用于肾脏疾病的研究,对肾脏疾病具有良好的治疗作用,但目前对其原发性肾炎的研究较少,且相关的靶点及调控机制尚未明确。本课题使用经典的MsPGN模型慢性血清病肾炎,观察TGP对MsPGN模型大鼠的干预作用,同时从TGP对炎症调控作用以及对PI3K/AKT信号转导通路中相关信号分子影响作用,探讨TGP对MsPGN的干预机制。方法使用改良性慢性血清病肾炎模型模拟MsPGN病变过程。采用免疫学方法制备慢性血清病肾炎大鼠模型：牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)预免疫+BSA正式免疫+脂多糖(LPS)。探讨TGP对MsPGN模型大鼠的治疗作用及其干预机制。1观察TGP对MsPGN模型大鼠的影响随机选取8只大鼠作为空白对照组,其余大鼠用免疫法进行造模,模型检验成功后随机分成模型对照组、白芍总苷高剂量组、白芍总苷低剂量组和醋酸泼尼松组。随后给予药物,灌胃给药5周,给药期间观察大鼠的一般情况并测定24h尿蛋白排泄量。给药5周后,取大鼠血清检测血肌酐(Serum Creatinine,SCr)、尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、白蛋白(Albumin,ALB)、总蛋白(Total protein,TP)、丙二醛(Malondialdehyde, MDA)和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)。同时取大鼠肾脏进行HE染色观察大鼠肾脏组织的病理变化,免疫荧光观察肾小球IgG、C3沉积情况,免疫组织化学法观察足细胞损伤标记蛋白Desmin表达情况。综合评价TGP对MsPGN模型大鼠的治疗作用。2观察TGP对MsPGN模型大鼠炎症调控的影响。给予药物干预5周后,采用磁珠捕获法用流式细胞仪对大鼠血清中IL-α、IL-2、IL-10、IFN-γ含量进行测定；使用免疫组织化法观察巨噬细胞标记蛋白CD68的表达情况。评价TGP对MsPGN大鼠血清中炎症因子的影响以及对肾脏中巨噬细胞炎症浸润的影响。3探讨TGP对MsPGN模型大鼠肾脏中PI3K/AKT信号转导通路的影响作用。药物干预治疗5周后,提取大鼠肾脏总RNA用qRT-PCR检测大鼠肾脏中AKT、 GSK3-β、Cyclin D1、IκB、NF-κB的mRNA的表达情况；提取大鼠肾脏总蛋白用Western blot检测PI3K、T-AKT、P-AKT、P-GSK3-β、Cyclin D1蛋白表达情况,以及提取大鼠肾脏组织核蛋白检测NF-κB蛋白表达情况。探讨TGP对MsPGN模型大鼠肾脏中PI3K/AKT信号转导通路的影响。结果：1 TGP对MsPGN模型大鼠的影响结果显示,与模型对照组比较,白芍总苷高、低剂量组能改善MsPGN模型大鼠的活动、进食、毛发光泽等基本情况情况。同时还能够降低MsPGN模型大鼠的24h尿蛋白排泄量,降低血清中SCr、BUN、TG、TC、MDA含量,升高血清中ALB、TP、SOD含量,抑制疾病引发的肾脏肿大。肾脏病理结果显示白芍总苷高、低剂量组能减少MsPGN模型大鼠肾脏中系膜细胞增殖,修复肾小管损伤,减少肾间质炎性浸润。免疫荧光结果显示白芍总苷高、低剂量组能够减少MsPGN模型大鼠肾小球中IgG、C3沉积。免疫组化结果显示白芍总苷高、低剂量组能减少MsPGN模型大鼠肾脏中足细胞损伤标志蛋白Desmin的表达。2 TGP对MsPGN模型大鼠炎症调控的影响结果显示,与模型对照组比较,白芍总苷高、低剂量组能降低MsPGN模型大鼠血清中IL-α、IL-10、IFN-γ含量,升高IL-2含量；免疫组化结果显示白芍总苷高、低剂量组能减少MsPGN模型大鼠肾脏中巨噬细胞标记蛋白CD68的表达。3 TGP对MsPGN模型大鼠肾脏中PI3K/AKT信号通路相关信号分子的影响作用qRT-PCR结果显示,与模型对照组比较,白芍总苷高、低剂量组大鼠肾脏Cyclin D1、NF-κB的mRNA的表达显著性降低,IκB的mRNA表达显著性升高,AKT和GSK3-P的mRNA的表达没有差异;Western blot检测结果显示,白芍总苷高、低剂量组大鼠肾脏PI3K、P-AKT、P-GSK3-β、Cyclin D1以及NF-κB蛋白表达减少,T-AKT, P-GSK3-α蛋白表达没有差异。结论：1 TGP对MsPGN模型大鼠具有良好的治疗作用,能够减少24h尿蛋白的排泄,改善大鼠的肾功能,改善高血脂和低蛋白血症的状况。同时,TGP能改善MsPGN模型大鼠肾脏的病理损伤,减少肾小球中IgG和补体C3的沉积,修复受损的足细胞。2 TGP能够调节MsPGN模型大鼠体内的免疫紊乱,调节细胞因子的水平,减少巨噬细胞在肾脏中的炎性浸润。3 TGP能够影响PI3K/AKT信号转导通路的活化,调控其下游的信号分子蛋白表达,改善MsPGN模型大鼠肾脏损伤。