bFGF调节人内皮细胞ICAM-1表达的研究 前言 创伤是广泛危害人类的“发达社会疾病”,深入研究创伤后的组织修复问题依然是医学领域的重点。创伤修复是一个复杂而有序的生物学过程,涉及多种炎症细胞、修复细胞、炎症介质、生长因子和细胞外基质等成分的共同参与。在组织修复研究中,各种生长因子在其中的作用及调控机制成’为现代创伤修复研究的热点。成纤维细胞生长因子(FGF),尤其是碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)具有广泛的生物学活性,是伤口愈合过程中所有相关细胞的促有丝分裂原、化学趋化及调节蛋白,可以影响创伤修复的整个过程。目前有关于bFGF促进内皮细胞(EC)增殖、调节EC蛋白表达、分泌,促进血管新生、肉芽组织形成方面的研究报道,但有关bFGF调节内皮细胞黏附分子表达,影响早期炎症反应的研究则报道很少,对EC细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,国内尚未见报道。 本实验通过研究bFGF调节人脐静脉内皮细胞(HUVEC)ICAM-1表达的时间效应,及糖皮质激素地塞米松(Dex)对bFGF调节ICAM-1表达的影响,来阐述bFGF影响修复早期炎症反应,进而促进创伤修复的可能机制。 方法 1.EC的培养:采用本室改进的Jaffe氏法进行HUVEC培养。经免疫荧光检测Ⅷ因子抗原阳性,鉴定为血管内皮细胞,采用1-3代EC进行实验,待细胞达亚融合状态后,换无血清培养液24h,之后施加各实验因素。2.HUVEC ICAM-1表达的测定:实验分组:(1)不同时间组:对照组(无血清DMEM);实验组:bFGF(500ng/ml)12h、16h、24h、48h组(2)不同因素组(16h):对照组(无血清DMEM);bFGF(500ng/ml)、Dex(0.1μmol/L)、bFGF+Dex组。采用免疫细胞化学法(SP法)及流式细胞仪检测法分析EC