SOCS低甲基化在过敏性紫癜儿童Th17/Treg细胞失衡中的作用研究

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目的探讨SOCS低甲基化与过敏性紫癜儿童Th17/Treg细胞失衡的关系,进一步探讨HSP的免疫发病机制。方法选取2014年6月至2015年2月我院心肾免疫儿科收入院的32例急性期HSP患儿作为研究对象,另将在我院儿童保健科门诊健康体检的28例儿童作为正常对照组。采用ELISA法检测血浆IL-6水平;流式细胞术检测外周血CD4+IL-17A+T细胞(Th17细胞)比例、CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)比例和CD4+T细胞磷酸化STAT3(p STAT3)蛋白平均荧光强度(MFI);实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测CD4+T细胞SOCS1、SOCS3基因m RNA表达;高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)分析法检测外周血单个核细胞SOCS1基因外显子2、SOCS3基因5’端非翻译区(5’-UTR)可能的STAT3结合位点Cp G岛甲基化水平。采用独立样本t或t′检验进行统计学分析。结果1.HSP儿童血浆IL-6浓度、CD4+T细胞p STAT3蛋白平均荧光强度(MFI)显著高于正常对照组(t=16.488,P<0.01;t=9.338,P<0.01);2.HSP组CD4+IL-17A+T细胞显著上调(t=7.585,P<0.05),CD4+CD25+T(Treg)细胞明显低于正常对照组(t=4.582,P<0.01),差别有统计学意义;3.HSP组儿童急性期外周血单个核细胞SOCSlm RNA和SOCS3 m RNA水平均显著高于同年龄对照组(t=8.436,P<0.01;t=8.153,P<0.01),差别有统计学意义;HSP组SOCS1 m RNA表达与Th17/Treg成负相关(r=-0.328,P<0.05),SOCS3m RNA表达与Th17/Treg成显著负相关(r=-0.413,P<0.01),CD4+T细胞p STAT3蛋白表达与Th17/Treg成显著正相关(r=0.410,P<0.01);4.急性期HSP组儿童SOCSl基因外显子2、SOCS3基因5’-UTR区可能的STAT结合位点的Cp G岛呈低甲基化,而正常对照组呈完全去甲基化状态。结论SOCS1、SOCS3基因低甲基化致其相对表达不足可能是HSP患儿Th17/Treg失衡的因素之一。
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