本研究旨在明确纳米马钱子碱脂质体(NBL)中枢镇痛作用的基础上，开展NBL调控内源性阿片肽(EOP)镇痛机理的研究。通过采用福尔马林疼痛模型，观察NBL对福尔马林致痛大鼠行为学的影响，分析和判断NBL的发挥镇痛作用的有效成分；应用化学荧光法考察NBL对外周单胺类神经递质的影响，分析NBL的镇痛作用与外周单胺类神经递质的关系，进一步明确NBL的中枢镇痛作用；应用RT-PCR技术分别测定NBL对福尔马林致痛大鼠下丘脑β-内啡肽(β-EP)、亮氨酸-脑啡肽(L-Enk)和强啡肽B(Dyn B)前体mRNA水平表达的影响，明确NBL通过促进EOP系统的合成而发挥中枢镇痛作用；采用脑微透析技术结合酶联免疫吸附测定法(ELISA)考察福尔马林致痛大鼠脑室脑脊液中β-EP、L-Enk和Dyn B浓度变化，以明确NBL促进EOP的释放而发挥中枢镇痛作用。通过以上研究揭示NBL调控EOP系统的镇痛途径及机理。结果如下：　　 1.行为学研究显示：马钱子碱是NBL发挥镇痛作用的主要有效成分。相同给药量的NBL镇痛效应持续到造模后45min左右（即给药后55min左右），而Brucine持续到造模后35min。NBL无论是镇痛作用时间还是镇痛作用均显著优于Brucine，显示了纳米制剂缓释及增效的优越性。　　 2.化学荧光法研究显示：NBL对福尔马林致痛大鼠外周单胺类神经递质的影响与剂量有一定的关系：除3mg.kg-1的NBL和6mg.kg-1的Brucine对福尔马林致痛大鼠外周5-HT含量有一定影响外，其余剂量的NBL外周用单胺类神经递质均无显著性影响。进一步明确了中剂量以上的NBL的镇痛途径为中枢镇痛。　　 3. RT-PCR研究显示：NBL和Brucine给药后2h均能显著增加福尔马林致痛大鼠下丘脑POMC、PENK和PDYN的mRNA水平表达，并趋于接近正常大鼠水平。但NBL对福尔马林致痛大鼠下丘脑PENKmRNA水平调控强于Brucine，部分体现了纳米化后增效的优势。　　 4.微透析联合ELISA测定法研究显示：NBL与Brucine对福尔马林致痛大鼠脑脊液中β-EP、L-Enk和Dyn B浓度的影响呈现明显的时效性：NBL和Brucine在给药后0～1h内均能显著增加福尔马林致痛大鼠脑脊液中β-EP、L-Enk和Dyn B的浓度，并达到峰值。在给药后1～2h内，NBL虽然能显著增加福尔马林致痛大鼠脑脊液中β-EP、L-Enk和Dyn B的浓度，但与较给药后0～1h内相比有一定的下降；而Brucine对福尔马林致痛大鼠脑脊液中β-EP、L-Enk的影晌与NBL类似，但对Dyn B含量无显著性影响。在给药后2～3h内，无论是NBL组还是Brucine组福尔马林致痛大鼠脑脊液中的β-EP浓度均有所下降，而L-Enk和DynB浓度均下降至正常大鼠水平。这一结果说明了在一定的时间范围内，NBL和Brucine都能在脑部促进β-EP、L-Enk和Dyn B的释放产生中枢镇痛作用。　　 相同给药量的NBL和Brucine比较，无论是在给药后0～1h内还是给药后1h～2h内，NBL组大鼠脑脊液中β-EP、L-Enk、Dyn B的浓度均显著高于Brucine组，表明马钱子碱制备成纳米脂质体后无论是在用量还是在作用强度上都显示出纳米制剂的优越性。　　 因此，本研究既明确了NBL的镇痛成分即为Brucine，又进一步确认了其中枢镇痛途径，同时也表明了其中枢镇痛与调控EOP的密切关系。在一定的时间内，NBL既能显著增加福尔马林致痛大鼠下丘脑前脑啡肽(PENK)、前阿黑皮素(POMC)和前强啡肽(PDYN)的mRNA水平表达，从而增加EOP的脑部合成；又能显著增加福尔马林致痛大鼠脑脊液中β-EP、L-Enk和Dyn B的浓度，从而促使EOP的释放。Brucine对EOP的调控与NBL类似，但无论是在用量、时效性、作用强度上都弱于NBL,显示出纳米制剂的优越性。