背景中药灌肠剂是指将中草药或中成药制成符合要求的水性、油性溶液或者混悬液,灌注于直肠以达到治疗、诊断或营养的目的。我国很多古代医书都有关于中药灌肠剂治疗疾病的记载。早在一千多年前,《伤寒论》中就有“猪胆汁—枚,泻汁,和少许法醋,以灌谷道内”的记载,实为最早的中药灌肠剂。目前研究表明,中药灌肠剂具有以下特点：①生物利用度高：与口服用药相比,药物灌肠后可以通过直肠黏膜直接吸收,所以药物的有效成分大部分不经过肝脏而直接进入大循环,避免了肝脏的首过效应,防止或减少药物在肝脏被破坏,也防止胃肠消化液对药物的破坏,使药物的生物利用度得到了充分的发挥。②吸收快、显效迅速、维持时间长。③符合中医辩证施治的要求与中医用药的经验：中药灌肠剂保持了传统中药汤剂的特点,可以根据病情的变化和需要加减药物、灵活配制处方。④适用范围广泛：只要能通过口服达到治疗效果的疾病都可以用灌肠的方法治疗。⑤不受药物及剂型的限制：只要是能够口服的制剂像汤剂、合剂、糖浆剂、煎膏剂、浸膏剂、散剂、颗粒剂、丸剂、丹剂等等均可根据药性和用量加以溶解或稀释制成灌肠剂来使用。另外,中药灌肠剂的制备工艺简单,操作容易,不受任何条件限制,因此便于在基层医院里自行制备,使用更加方便。广东地产药材崩大碗,又名积雪草、连钱草、地钱草、马蹄草、老公根、葵蓬菜、崩口碗、跳破碗、雷公碗等,为伞形科植物积雪草Centella asiatica (L.) Urban的全草。广泛分布于长江流域以南各地,是广东地区民间常用的中草药,以全草入药。有清热利湿、活血止血、解毒消肿等功效。在广东民间早已有应用崩大碗煎汁灌肠治疗慢性肾衰竭(CRF)的用法。广东省中山市中医院肾内科亦根据当地民间的应用方法与经验试用崩大碗水煎汁灌肠治疗CRF患者20多例,取得较好疗效。复方崩大碗在长期的临床实践中显示能改善CRF患者症状,降低血肌酐、尿素氮及24h尿蛋白定量。本课题依据现代医学和祖国医学对CRF的病因及病机的综合分析和研究,采用中医传统的灌肠治疗方式,选用广东地产药材崩大碗作为主药的复方制剂,用现代科学的研究方法来研究和评价复方崩大碗中药灌肠剂治疗CRF的药理作用,为该药的临床应用提供更为有利的科学依据。目的研究复方崩大碗灌肠剂对慢性肾衰模型大鼠的尿生化指标、血生化指标、肾脏系数以及肾脏组织的影响。方法1.SPF级的SD大鼠70只,雌雄各半,体重220-280g,食用SPF级饲料,饮用水为消毒过的水,每天自由摄食及进水。正常饲养适应一周后,对每只大鼠进行称重,在体重为200±10g的范围内,挑选毛色、体态相近的正常大鼠10只(雌雄各5只)作为空白组,每天喂食正常饲料；其余大鼠全部喂食0.5%的腺嘌呤饲料,进行实验造模。造模期间观察大鼠的体重、尿量、体毛和一般活动状况。造模第30d于代谢笼中取大鼠24h尿液,并剪尾采血；分别采用干式化学法测定造模大鼠的尿常规、双缩尿比色法测定尿蛋白(PRO),酶偶联速率法测定血尿素氮(BUN)、肌氨酸氧化酶法测定肌酐(Cr)水平,观察造模程度。2.造模30d后开始给药,给药期间除空白对照组外,造模大鼠继续喂食腺嘌呤饲料。将造模大鼠分为5组,每组12只：模型对照组、复方崩大碗灌肠剂高剂量组(22.5g·kg-1)、复方崩大碗灌肠剂中剂量组(15.0g·kg-1)、复方崩大碗灌肠剂低剂量组(7.5g·kg-1)、尿毒清对照组(3.68g·kg-1)、空白对照组和模型对照组灌以消过毒的蒸馏水(10ml·kg-1)。除了尿毒清组采用灌胃给药方式外,其余各组均灌肠给药。以上剂量每日给药1次,连续给药30d。3.给药30d后进行样本采集与检测：取大鼠24h尿液,将大鼠麻醉,从腹主动脉插管采血。检测项目：①24h尿蛋白定量定量(UTP)；②血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平。4.另购70只SD大鼠,雌雄各半,体重180-220g,以相同方法造模30d。5.造模30d后开始给药,给药期间除空白对照组外,造模大鼠继续喂食腺嘌呤饲料。将造模大鼠分为5组,每组12只：模型对照组、复方崩大碗灌肠剂高剂量组(19.56g·kg-1)、复方崩大碗灌肠剂中剂量组(9.78g·kg-1)、复方崩大碗灌肠剂低剂量组(4.89g·kg-1)、尿毒清对照组(3.68g·kg-1)、空白对照组和模型对照组灌以消过毒的蒸馏水(10ml·kg-1)。全部药物采用灌胃给药方式给药。以上剂量每日给药1次,连续给药30d。6.给药30d后进行样本采集与检测：将大鼠麻醉,从腹主动脉插管采血。检测项目：①血钾(K)、钠(Na)、钙(Ca)、磷(P)的含量检测；②红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)、和血细胞比容(HCT)的检测；③处死大鼠后摘除肾脏,称重,用10%甲醛固定进行病理切片的观察。7.统计方法：实验资料用均数±标准差(x±s)表示,统计方法为方差分析,结果采用SPSS13.0统计软件包处理,方差分析采用One-Way ANOVA。方差齐性时各组之间多重比较采用LSD检验；方差不齐时采用近似方差分析的Welch实验方法。以上检验以P<0.05为差异有统计学意义。结果1.对大鼠UTP水平的影响：与空白组比较,模型对照组大鼠尿中UTP水平明显升高(P<0.05)。与模型对照组相比,复方崩大碗灌肠剂三个剂量组和尿毒清对照组的大鼠尿中UTP水平显著降低(P<0.05)。2.对大鼠血BUN、Cr的影响：与空白组比较,模型对照组大鼠血中BUN和Cr水平明显升高(P<0.05)。复方崩大碗灌肠剂三个剂量组和尿毒清对照组血中BUN、Cr水平显著低于模型对照组(P<0.05)。3.对大鼠电解质的影响：CRF大鼠由于代谢异常,导致渗透性利尿,因而体内的水电解质平衡紊乱,出现高钾、高磷、低钠、低钙和低氯。经复方崩大碗灌肠剂治疗后,我们可以看到相对于模型组电解质有了显著变化,尤其是高剂量组和尿毒清对照组都有显著变化(P<0.05)。4.对大鼠血液的影响：CRF大鼠由于长期喂养含腺嘌呤的饲料,可造成进食量明显下降,红细胞生成的原料摄入不足,从而引起红细胞压积(HCT)、红细胞计数(RBC)和血红蛋白(HGB)含量的明显下降。经治疗后我们可以看到,尿毒清对照组和复方崩大碗灌肠剂高剂量组均可以显著升高CRF大鼠的HCT、RBC和HGB的含量(P<0.05)。复方崩大碗中剂量组和低剂量组对RBC也有显著的升高作用(P<0.05)。5.对大鼠肾脏系数的影响：肾脏系数是肾脏重量与体重的比值,可直接反映肾脏的病变情况。由于CRF大鼠的肾组织内有大量腺嘌呤代谢物结晶沉积,因此呈“大白肾”状态,所以与空白对照组比较,模型对照组大鼠的肾脏系数明显高于空白对照组(P<0.05)。而经过给药治疗的复方崩大碗灌肠剂高剂量组和尿毒清对照组的肾脏系数显著低于模型对照组(p<0.05),但中剂量组和低剂量组则不显著。6.对大鼠肾脏组织的影响：肉眼观察可见除空白对照组以外,其余各组均呈“大白肾”状态,尿毒清组和复方崩大碗高剂量组的肾脏表面较模型组光滑,颗粒感不强。病理图片显示模型组可见肾皮质肾小管内有大量金黄色结晶,肾小球数目减少,有较多的肾小球变性,多数肾小球系膜细胞(MC)增生,细胞外基质(ECM)增多,肾小球囊腔扩大,球囊粘连,肾小球管腔扩大,部分腔内有蛋白管型,间质结缔组织增生。而尿毒清组和复方崩大碗灌肠剂高剂量组的肾小球数目较模型组多,少数MC增生和ECM增多,偶见球囊粘连,但部分肾小管腔内仍有蛋白管型,间质结缔组织仍有增生。复方崩大碗中剂量组和低剂量组与模型组的差异则不明显。结论高剂量的复方崩大碗灌肠剂能明显改善CRF大鼠的症状,使模型大鼠的活动、体重、精神状态、外观更接近正常大鼠。根据肾脏系数指标我们可以看出,高剂量的复方崩大碗灌肠剂能够使肾组织内结晶沉积物减少,纤维组织增生减轻。对肾脏的肉眼观察也能明显看出“大白肾”表面的颗粒状明显好于模型对照组。通过对大鼠血液生化指标的检验我们可以得出：高剂量的复方崩大碗灌肠剂能够调节CRF大鼠体内的电解质水平,使高钾、高磷、低钠、低钙和低氯状态有显著缓解。同时,高剂量的复方崩大碗灌肠剂还可以明显升高CRF大鼠的红细胞压积(HCT)、红细胞计数(RBC)及血红蛋白(HGB),改善CRF大鼠贫血的趋势。因此,我们可以得出结论：高剂量的复方崩大碗灌肠剂对腺嘌呤所致的CRF大鼠有显著的治疗作用。