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目的：研究TLR3、TLR9在皮肤天然免疫系统中的作用及调控机制，深入了解皮肤在天然免疫和获得性免疫中的桥梁作用，为预防和治疗皮肤免疫性疾病提供新的作用靶点。方法：通过体外培养人角质形成细胞株HaCaT细胞和真皮成纤维细胞，应用免疫组化、real-time PCR、流式细胞术和Western blotting方法考察TLR3、TLR9在两种细胞上的调控特征，探讨TLRs在天然免疫和获得性免疫中的桥梁作用。在此基础上，研究地塞米松、霉酚酸和他克莫司对TLR3、TLR9及其信号转导通路的干预作用。探讨CpG-ODN的乙肝质粒DNA柔性脂质体经皮肤以TLR9为靶标进行免疫的可行性，并从离体角度研究经皮免疫的机制，证明TLR9及其信号通路在经皮免疫接种中的作用机制。结果：确定了TLR3、TLR9在HaCaT和真皮成纤维细胞有表达，且可特异性的识别其相应的配体poly(I：C)和ODN2216，其信号转导通路是MyD88依赖性的，通过调控MyD88信号通路，可激活获得性免疫，使得Th1和Th2型细胞因子的分泌均有不同程度的增加，但是以诱导Th1型为主。Th1型细胞因子也可对TLR3、TLR9及其信号转导通路进行调控，形成天然免疫-获得性免疫调控网络。EGF可显著增强HaCaT细胞TLR3、TLR9的表达，调控其信号转导通路。免疫抑制剂霉酚酸和地塞米松对正常的HaCaT细胞的TLR3、TLR9受体及其信号通路无显著性影响，但对配体激活状态下HaCaT细胞表现出免疫抑制作用。他克莫司并未显示出对TLR3、TLR9及其信号转导通路的影响作用。构建了新的可表达CpG-ODN的乙肝质粒DNA柔性脂质体，证明了其经皮肤以TLR9为靶标进行免疫的可行性，并从离体角度研究经皮免疫的机制，研究了TLR9及其信号通路的作用机制，有助于更好的产生抗体和细胞免疫反应。结论：研究了TLR3、TLR9在皮肤天然免疫系统中的作用及调控机制，探讨了免疫抑制剂和新型疫苗对该靶点作用的可行性，为该领域新的TLRs激动剂和拮抗剂的研制开发展现了广阔的前景，同时为经皮免疫提供了良好的技术支持和理论依据。