目的： 视网膜新生血管及其并发症严重损害视功能，由于其发病机理尚未完全明了，因此目前仍无确切有效的药物治疗方法。缺氧条件下RPE细胞中VEGF表达增加对毛细血管内皮的增殖起着重要的作用，提示RPE细胞可以作为抗视网膜新生血管生成基因治疗的靶细胞，而研究表明Racl可能是调控多种血管生成相关因素的关键分子。本实验通Racl-siRNA载体转染视网膜色素上皮细胞的体外实验，研究Racl对视网膜色素上皮细胞的作用，为进一步探讨Racl治疗视网膜新生血管性疾病的可能性提供实验性理论依据。 方法： ①常规培养RPE细胞，当细胞长至50％融合状态时，加入脂质体2000介导的转染载体，培养24h后观察细胞的形态及转染效率。 ②同法转染载体后使用125umol/L的COCl<,2>行缺氧处理。 ③24h后荧光显微镜下观测荧光，计算转染效率；显微镜下观测细胞的形态。 ④MTT法检测对细胞增殖的影响。 ⑤使用RT-PCR及免疫细胞化学方法检测Racl、VEGF、HIF-1α和NF K-B的表达。 结果： ①Racl-siRNA载体体外转染RPE细胞后观察细胞，形态没有明显的改变，当载体的转染浓度为3ug/L时转染有较高的效率：15～20％。 ②以3ug/L的转染浓度转染RPE细胞，使用125umol/L的COCl<,2>行缺氧处理24h后，观察细胞形态无明显改变；转染效率无明显变化，为15～20％。 ③用MTT法检测发现转染对细胞的增殖无显著影响(P>0.05)。 ④使用荧光定量RT-PCR及免疫细胞化学方法检测Racl、VEGF、HIF-1α和NFK-B的表达均减弱，差异具有显著性(P<0.05)。 结论： 本实验的研究结果表明：Racl-siRNA载体转染RPE后，对RPE细胞的形态和增殖没有明显的改变，并且抑制了Racl、VEGF、HIF-1a和NF K-B的表达。因此可以通过阻断Racl在缺氧信号通路中的表达，抑制新生血管的生成。