系统性硬化症外周血microRNA表达谱的初步研究

来源 :北京协和医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hudanrong
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背景:系统性硬化症(systemic sclerosis, SSc)是一种不明原因的弥漫性结缔组织病,临床上以皮肤增厚和纤维化为主要特征,还可累及肺、消化道、肾和心脏等多个器官。SSc的发病机制不明,目前认为主要涉及微血管损伤、纤维化和自身免疫系统异常这三个方面,对其发病机制的深入研究将有助于提高临床诊治水平。microRNAs (miRNA)是一类内源性非编码小分子单链RNA,通过与靶基因的信使RNA (messenger RNA, mRNA)结合,促使mRNA降解或抑制其翻译,从而抑制靶基因的表达,广泛参与调控细胞增殖、分化、凋亡和组织器官发育等生物学过程。目前已经证实miRNA的异常表达与多种疾病的发生发展密切相关。与SSc发病相关的miRNA研究目前尚很缺乏。目的:采用高通量miRNA芯片技术筛选SSc患者PBMC中差异性表达的miRNAs,通过生物信息学分析,挑选与SSc密切相关的miRNAs,在大样本量SSc患者中进行验证,并探寻miRNA表达水平与SSc患者临床特征的相关性。方法:1.通过miRNA表达谱芯片检测4例初治SSc患者及4例健康对照PBMC中的miRNA表达谱,应用分层聚类分析筛选出SSc患者中差异性表达的miRNAs。2.通过文献检索和生物信息学分析,挑选出与SSc相关的miRNAs,进行靶基因预测及信号通路分析。3.应用real-time PCR方法验证上述miRNAs在大样本SSc患者中的表达情况,分析其表达水平与临床特征及实验室指标的相关性。结果:1. MiRNA芯片在初治SSc的PBMC中筛选出47个差异性表达的miRNAs,其中29个表达上调,18个表达下调。2.通过文献检索和生物信息学分析,挑选出miR-29a、miR-125b和miR-140与SSc相关的miRNAs。3. Real-time PCR证实miR-29a和miR-125b在SSc患者PBMC中表达水平显著低于健康对照。miR-140在SSc患者中无差异性表达。4.SSc患者PBMC中miR-125b的表达水平与PASP及hsCRP相关,与临床症状及其他实验室指标未发现统计学相关性。结论:研究结果表明SSc患者PBMC中存在差异性表达的miRNAs,其异常表达可能是SSc的发病机制之一。miR-29a和miR-125b的表达水平在SSc患者中显著降低,并与特定临床特征、炎性指标及靶器官损害指标相关,有可能成为辅助SSc诊断和预后评估的新方法。
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