前梯度蛋白2(anterior gradient-2,AGR2)自发现以来就备受重视,现阶段的研究主要集中于内源性和分泌性AGR2在各种肿瘤中的作用及机制。AGR2蛋白结构特殊,在细胞内定位广泛,功能复杂多样。近期的一些研究证实AGR2可以与IGF-1、HIF-1 α、p38等相互作用促进乳腺癌细胞对化疗药物的治疗产生耐药性。但是这些研究对于机制的研究都比较浅显,而且对于AGR2在其他肿瘤的耐药性中是否发挥功能及发挥功能的方式、机制都没有研究。我们想通过我们的研究探究AGR2在不同肿瘤耐药性中发挥的作用,并进一步总结出一条AGR2在肿瘤耐药性中发挥作用的通用机制。本研究主要探究AGR2在乳腺癌细胞和肝癌耐细胞的耐药性中发挥的功能和机制,以乳腺癌细胞MCF-7和肝癌细胞BL-7402及其耐药细胞BL-7402/FU为工具细胞。细胞免疫荧光实验和Western Blot实验结果均表明AGR2在MCF-7和BL-7402/FU细胞中高表达,而在BL-7402细胞中的表达却很弱。AGR2在肝癌细胞BL-7402和其耐药细胞BL-7402/FU中的差异表达是一个非常有趣的现象,提示我们AGR2可能在肝癌细胞的耐药性中发挥作用。根据AGR2在各个细胞系中的表达量的不同构建MCF-7-AGR2敲除细胞系和BL-7402-AGR2过表达细胞系,并用siRNA敲降BL-7402/FU中的AGR2。在BL-7402-AGR2过表达细胞系中,过表达AGR2后细胞的抗凋亡能力明显增强,统计结果显示对照细胞和过表达细胞的实验结果有着显著的差异(p=0.0011<0.01,p=0.0005<0.001)。在 MCF-7-AGR2 敲除细胞系的实验中显示敲除组凋亡细胞数量增多,即细胞的抗凋亡能力降低,而且MTT实验结果显示敲除组细胞的增殖能力也减弱(p=0.0003<0.001)。除此之夕外,用siRNA敲降BL-7402/FU细胞中的AGR2后,用AnnexinV-FITC/PI双染后经流式细胞仪检测发现敲降AGR2后的细胞凋亡比例增加,MTT结果显示敲降细胞增殖能力也减弱。综合以上研究结果,AGR2可以调控细胞的增殖和抗凋亡能力,使细胞能够在化疗药物的有效浓度中存活,并使细胞产生对药物的耐受性,最终导致肿瘤的耐药性。除此之外,我们对AGR2在这些功能中所依赖的信号通路也有了初步的探讨,为深入研究AGR2在肿瘤耐药性的功能及发挥功能的机制奠定了基础,也为应对肿瘤耐药性提供了一种新的治疗方案。