非酒精性脂肪肝患者外周血T淋巴细胞亚群表达PD-1的临床意义

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非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease NAFLD)是一类除饮酒和其他明确的肝损伤原因外所致的以肝细胞弥漫性大泡性脂肪变为主要特点的临床综合性疾病。NAFLD有影像学、血清学、组织病理学、分子学等多种诊断工具,但缺乏较灵敏的早期诊断NAFLD的检验指标。PD-1/PD-L1途径介导的共刺激信号发挥着负性免疫调节作用,在机体异常表达可导致免疫失衡,参与机体免疫病理过程。本研究通过检测NAFLD患者外周血淋巴细胞数量、T细胞数量和淋巴细胞亚群比例,分析了 CD4+T细胞和CD8+T细胞表达PD-1的情况,进一步分析PD-1的表达水平与NAFLD临床相关指标的相关性,初步探讨NAFLD患者的免疫功能状态的变化以及CD4+T细胞和CD8+T细胞表达PD-1的水平作为NAFLD的实验室早期筛查指标的价值,以期为NAFLD的早期干预和监测提供实验依据。目的:探讨非酒精性脂肪肝患者外周血T淋巴细胞亚群及其表达PD-1的临床意义,为早期筛查NAFLD患者提供实验指标。方法:采用流式细胞术分析30例成人非酒精性轻度脂肪肝,30例非酒精性中重度脂肪肝,30例正常成人外周血中CD3+T、CD4+T和CD8+T细胞比例,同时分析了 PD-1在CD4+T细胞和CD8+T细胞的表达水平,进一步分析PD-1的表达水平与临床指标的相关性,初步建立CD4+T细胞和CD8+T细胞表达PD-1水平作为NAFLD的早期诊断阈值,分析其敏感性和特异性。另检测54例外周血标本,根据B超结果,对CD4+T细胞和CD8+T细胞的PD-1表达水平作为诊断早期NAFLD的检验指标的敏感性和特异性进行验证。结果:1.轻度NAFLD组外周血淋巴细胞数量明显高于对照组(P<0.05),中重度NAFLD组外周血淋巴细胞数量明显高于对照组(P<0.05),轻度NAFLD组外周血淋巴细胞数量与中重度NAFLD组无显著差异(P>0.05);2.轻度NAFLD组和中重度NAFLD组CD3+T、CD4+T、CD8+T细胞比例与对照组相比无显著性差异(P>0.05);3.轻度NAFLD组CD4+T细胞和CD8+T细胞表达PD-1水平明显高于对照组,具有统计学意义(P<0.01);中重度NAFLD组CD4+T细胞和CD8+T细胞表达PD-1水平明显高于轻度NAFLD组和对照组,具有统计学意义(P<0.01);4.NAFLD患者CD4+T细胞和CD8+T细胞表达PD-1水平与NAFLD临床相关指标(ALT、AST、TG、HDL、UA、BMI)显著相关(P<0.05);5.CD4+T细胞表达PD-1水平诊断早期NAFLD曲线下面积(AUC)为0.756,CD8+T细胞表达PD-1水平诊断早期NAFLD曲线下面积(AUC)为0.769。两者联合诊断早期NAFLD曲线下面积(AUC)为0.793,敏感性76.7%,特异性76.7%。结论:非酒精性脂肪肝NAFLD患者外周血淋巴细胞数量明显升高,淋巴细胞亚群在病程中变化不显著,而PD-1分子在CD4+T细胞和CD8+T细胞上表达明显上调,提示了 NAFLD患者存在免疫功能紊乱。CD4+T细胞和CD8+T细胞表达PD-1水平与NAFLD相关临床指标显著相关,两者联合诊断NAFLD的曲线下面积为0.793,表明检测外周血CD4+T细胞和CD8+T细胞PD-1的表达水平对NAFLD具有早期诊断价值。
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