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化学发光免疫分析作为一种高特异性和高灵敏度的方法,在临床诊断、环境检测、食品安全等领域得到了日益广泛的应用。随着免疫分析技术的高速发展,往往需要对分析样品中的多种组分进行定量检测,如在食品安全领域,要对养殖业中“瘦肉精”类违禁药物的使用进行有效的监控,有必要发展可以同时检测多种“瘦肉精”类物质的多组分分析方法,以取代传统的对单种“瘦肉精”类物质分别检测的方法。多组分免疫分析具有分析通量高、样品消耗量少、分析时间短、分析成本低等优点,近年来成为免疫分析领域的研究热点之一。目前,己报道的多组分免疫分析方法主要可归纳为两大类：多标记物模式和空间分辨模式。多标记物模式的基本原理是以不同的信号探针标记不同组分,通过识别不同探针的信号来检测不同组分。阵列模式是另一种常见的多组分免疫分析模式,该方法运用空间分辨的策略在免疫反应器的不同空间区域以阵列方式固定不同组分的抗体,完成免疫反应后进行信号激发,然后以阵列检测器采集不同区域中的信号,实现多种组分的同时检测。本文基于这两种模式建立了两种化学发光多组分免疫分析方法,具体开展了以下工作：1)建立基于时间分辨化学发光策略的多组分免疫分析法本文以具备不同发光动力学特征的化学发光标记物作为信号探针,用于标记不同的免疫试剂(抗原或抗体),建立了基于时间分辨化学发光策略的多组分免疫分析新方法。经研究发现,辣根过氧化物酶(HRP)-H202-鲁米诺体系与碱性磷酸酶(ALP)-金刚烷二氧丁环磷酸盐体系有着截然不同的化学发光动力学特征且相互间兼容性较好。在实验中,以克伦特罗(CLE)和莱克多巴胺(RAC)这两种不同的“瘦肉精”类物质作为模型分析物,HRP和ALP作为信号探针分别标记CLE和RAC,得到两种示踪物分别为HRP-CLE禾ALP-RAC。采用竞争反应模式完成免疫结合之后,加入共反应剂引发化学发光反应,通过时间分辨方式在不同的时间窗口(0.6秒和25分钟)分别检测这两种分析物的化学发光信号,实现了单流程中CLE和RAC的同时免疫分析。由于检测时间窗口足够宽,因而可有效地避免相互间的交叉干扰。其线性范围均为1.0-500ng／mL,在信噪比为2时,检测限均为0.50ng／mL。实际样品检测结果证明了这是一种简单、可靠、低成本的多组分免疫分析方法。2)初步建立了基于空间分辨化学发光策略的多组分免疫层析分析法在本文中,我们基于空间分辨化学发光策略发展了一种简便、快速检测多种“瘦肉精”类物质的免疫层析试纸条。将不同抗原(RAC-BSA和SAL-BSA)分别包被于试纸条的硝酸纤维素膜的不同区域作为检测区1和检测区2,采用HRP作为信号探针分别标记RAC抗体和SAL抗体,经竞争性免疫结合之后,分别检测区1和检测区2处的化学发光信号,以实现多组分免疫分析。RAC和SAL分别在0.50-40ng/mL和0.10-50ng/mL的范围内与化学发光信号具有良好的线性关系,在信噪比为3时,检测限分别为170pg/mL和33pg/mL。该方法具有操作简单、检测迅速、灵敏度高、分析成本和仪器成本低等优势,可作为一种快速定量分析手段,并且一次性检测两种组分,大大提高了检测效率,具有很好的实际应用潜力。