【摘 要】
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虾是一类重要食源致敏物,主要过敏原为原肌球蛋白。其中的Pen a1,包含五个抗体结合区,已经被鉴定为几乎所有虾类中唯一最主要的致敏蛋白,与大多数水产甲壳类具有高度同源性和相似
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虾是一类重要食源致敏物,主要过敏原为原肌球蛋白。其中的Pen a1,包含五个抗体结合区,已经被鉴定为几乎所有虾类中唯一最主要的致敏蛋白,与大多数水产甲壳类具有高度同源性和相似性。虾导致的过敏主要是IgE引起的Ⅰ型变态反应,目前完整的虾致敏多克隆和单克隆IgE制备已有报道,而小分子虾致敏IgE体外制备尚无人涉及。本文试图从小分子抗体体外制备的取材与克隆入手,建立了简便有效的虾过敏原单表位体外免疫体系,获得了特异性B细胞克隆材料。此外鉴定获得5对κ、λ链引物,克隆出具有完整FRs、CDRs功能结构,且同源性达90%以上的可变区序列,并论证了体外免疫对抗体可变区克隆丰度的重要意义。本研究将为进一步构建虾致敏scFv、建立虾致敏抗体库、以及从分子水平研究抗体基因重排规律等提供有力的技术支持。
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