【摘 要】
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前列腺癌是男性中常见的癌症类型,也是致男性死亡的第二大恶性肿瘤。苹果多酚（apple polyphenol,AP）作为一种天然生物活性物质,其某些单体成分对一些癌症具有抗肿瘤作用,并且已有研究证明苹果多酚可以抑制乳腺癌细胞的增殖及转移,但在前列腺癌方面几乎没有研究,因此本文主要研究苹果多酚对前列腺癌是否具有抑制作用。希望可以为后续食源性物质特别是多酚类物质作为抗前列腺癌的潜在药物提供新思路。本研究
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前列腺癌是男性中常见的癌症类型,也是致男性死亡的第二大恶性肿瘤。苹果多酚（apple polyphenol,AP）作为一种天然生物活性物质,其某些单体成分对一些癌症具有抗肿瘤作用,并且已有研究证明苹果多酚可以抑制乳腺癌细胞的增殖及转移,但在前列腺癌方面几乎没有研究,因此本文主要研究苹果多酚对前列腺癌是否具有抑制作用。希望可以为后续食源性物质特别是多酚类物质作为抗前列腺癌的潜在药物提供新思路。本研究采用CCK8方法检测苹果多酚对不同前列腺癌细胞株和NIH3T3细胞的增殖抑制作用,结果表明苹果多酚作用LNCAP、22RV1、PC3细胞24h后的IC50值为16.52μg/m L、22.21μg/m L、284.5μg/m L,在此浓度下对NIH3T3细胞无明显毒性;通过HPLC检测苹果多酚的物质成分,结果表明苹果多酚中含有绿原酸（27%）、根皮苷（10.06%）、原花青素B2（4.51%）、EGCG（5.85%）、槲皮素（1.43%）,通过CCK8的方法检测不同物质对LNCAP细胞的增殖抑制作用,结果表明单个组分对LNCAP细胞抑制作用不明显。然后通过细胞划痕实验、transwell实验检测细胞的迁移及侵袭,通过克隆形成实验检测细胞的增殖能力,结果表明苹果多酚抑制这两种细胞的迁移、侵袭和细胞克隆的形成;用流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,结果表明苹果多酚促进细胞的凋亡并阻滞细胞周期。通过蛋白质免疫印迹和实时荧光定量PCR检测AR、PSA的表达,结果表明苹果多酚下调AR及PSA的表达;再利用蛋白质免疫印迹的方法检测苹果多酚对AR稳定性和核定位的影响,以及对PI3K/AKT/m TOR信号通路的影响,结果表明苹果多酚可能通过泛素-蛋白酶体途径促进AR的降解,对AR的核定位没有影响,但可以下调PI3K/AKT/m TOR相关蛋白的表达。最后通过动物实验评价苹果多酚的体内作用,结果表明苹果多酚抑制22RV1移植瘤的生长,并下调AR及PSA的表达。综上所述,本研究得出的结论:⑴苹果多酚抑制前列腺癌细胞的增殖,特别是对AR阳性前列腺癌细胞具有更好的抑制作用;⑵苹果多酚的物质组成为:绿原酸、根皮苷、原花青素B2、EGCG、槲皮素及其它物质;⑶苹果多酚抑制LNCAP、22RV1细胞的迁移、侵袭、克隆形成,促进细胞凋亡、阻滞细胞周期、抑制AR的表达及PI3K/AKT/m TOR信号通路;⑷苹果多酚对22RV1移植瘤的生长具有抑制作用。
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