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中药治疗皮肤疖肿溃疡涉及多方面作用,具有控制皮肤炎症、感染,增强自身修复和抵抗外界侵蚀等效应。针对临床常见疖肿溃疡病症,而中药的成分和作用复杂,本课题以中西医理论为指导,对潮汕地区特有的单瓣朱槿花苞治疗皮肤疖肿疡痈作用及机制做系统探讨。 一、朱槿花苞有效部位提取制备和部分理化鉴定 目的: 制备和分析单瓣朱槿花苞正丁醇萃取部位。 方法: 1、单瓣朱槿花苞采用70%乙醇溶液提取,制备乙醇粗提物,使用正丁醇有机溶剂萃取,烘干得有效萃取部位。 2、正丁醇萃取物以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5:4:1.5)为展开剂,在硅胶H薄层板和硅胶G薄层板分别展开分离,并以槲皮素、槲皮苷、异槲皮苷为标准物,于紫外灯下观察结果。 3、采用原子吸收光谱法测定单瓣朱槿花苞中铜、铁、锌微量元素。 结果: 1、经制备得单瓣朱槿花苞乙醇提取物和正丁醇萃取物,分别命名为HrBA、HrBN,计算HrBN平均出膏率为2.8%。 2、HrBN部位紫外薄层色谱中,与槲皮素标准品色谱相应位置上显现相同斑点,而槲皮苷和异槲皮苷色谱相应位置上未显现相同斑点。 3、单瓣朱槿花苞中铜、铁、锌微量元素平均含量分别为12.31 mg/g、50.61 mg/g、71.87 mg/g。 二、朱槿花苞治疗皮肤疖肿溃疡药理作用研究 目的: 探讨单瓣朱槿花苞提取物治疗皮肤疖肿溃疡的药理作用。 方法: 1、昆明小鼠80只,采用疖肿动物模型,随机分为模型组、环丙沙星(阳性药)组、单瓣朱槿花苞组和重辦朱槿花苞组,造模处涂药9日,观察各组痊愈情况。 2、昆明小鼠60只,采用疖肿动物模型,随机分为模型组、环丙沙星(阳性药)组、单瓣朱槿花苞乙醇提取物(HrBA)组、正丁醇萃取物(HrBN)组、乙酸乙酯萃取物(HrBE)组、氯仿萃取物(HrBC)组,造模处涂药9日,观察各组痊愈情况。 3、昆明小鼠30只,采用疖肿动物模型,随机分为模型组、百多邦(阳性药)组、HrBN组,造模处涂药9日,制备皮肤组织病理切片,观察各组痊愈情况。 4、昆明小鼠150只,采用全层切除动物模型,随机分为模型组、百多邦(阳性药)组、HrBN低浓度组(40 mg/mL),中浓度组(80 mg/mL),高浓度组(160 mg/mL),造模处涂药8日,制备皮肤组织病理切片,观察各组痊愈情况。 结果: 1、单瓣朱槿花苞组可缩短痊愈时间,提高痊愈率。 2、HrBN可提高小鼠疖肿的痊愈率,HrBA、HrBN、HrBE、HrBC各组药效评分分别为8.5±2.41分、9.75±0.79分、6.75±3.91分、3.75±1.76分。 3、HrBN可加速疖肿消减,提高痊愈率。组织切片结果显示,HrBN组无坏死组织,组织内炎症显著减轻,表皮组织修复明显优于模型组。与模型组相比,HrBN组具有较高的药效评分(P<0.05)。 4、HrBN可提高创口结痂率和痊愈率。组织切片结果显示,HrBN高浓度组表皮无缺失,组织内炎症显著减轻,创面明显收缩,部分皮肤附属器官可见再生,外表皮修复均优于低、中浓度组和模型组。与模型组相比,HrBN低、中、高浓度组具有较高药效评分(P<0.05)和痊愈率(P<0.05),且具有量效关系。 三、朱槿花苞治疗皮肤疖肿溃疡药理作用机制初探 目的: 初探单瓣朱槿花苞治疗疖肿溃疡的作用机制。 方法: 1、采用肉汤常量稀释法和琼脂扩散法,测定朱槿花苞不同提取物的体外抗菌活性,并测定MIC值。 2、采用碳粒廓清实验方法,测定对照组、左旋咪唑(阳性药)组、HrBA低、高浓度组和HrBN低、高浓度组的碳粒廓清指数和吞噬指数。 结果: 1、HrBN、HrBA的AB-8树脂30%乙醇段和60%乙醇段洗脱产物金葡菌的MIC分别为100 mg/mL、2.5 mg/mL、20 mg/mL。HrBN、HrBE、及HrBA的AB-8树脂60%乙醇段洗脱产物铜绿假单胞菌的MIC分别为200 mg/mL、37 mg/mL、80 mg/mL。 2、HrBN具有提高碳粒廓清能力作用,与对照组相比,可显著提高巨噬细胞廓清指数和吞噬指数(P<0.05)。 四、朱槿花苞外用制剂的初步研究 目的: 研究朱槿花苞外用制剂的制备和药效。 方法: 采用水包油乳膏剂制备方法,优化制剂工艺。采用全层切除动物模型验证乳膏剂药效。采用凝胶面膜制剂制备方法,制备朱槿花苞鲜花瓣面膜。 结果: 朱槿花苞乳膏制剂为红棕色膏状物,质地均匀细腻。朱槿花苞乳膏剂能够显著提高结痂率和痊愈率,促进溃疡小鼠的痊愈。 结论: 单瓣朱槿花苞有效部位正丁醇萃取物具有治疗皮肤疖肿溃疡作用,其所含的槲皮素可作为质量指标成分。朱槿花苞提取物具有提高巨噬细胞吞噬功能及体外抑菌作用。单瓣朱槿花苞乳膏剂具有良好的治疗皮肤溃疡作用。