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阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease AD),俗称老年性痴呆(senile dementia),是一种中枢神经系统原发性退行性变性疾病。发现至今,研究者一直没有停止对阿尔茨海默病的病因和发病机理的研究,但对于这一疾病的治疗至今还没有突破性的进展。随着细胞工程的迅速发展,干细胞移植治疗中枢神经系统疾病的研究为治疗AD开辟了新天地。人羊膜间充质干细胞(aminiotic membrane derived human mesenchymal stem cells, Ad-hMSCs)是近些年分离培养的多潜能干细胞。本实验深入探索静脉移植人第三代羊膜间充质干细胞在阿尔茨海默氏症转基因鼠体内的迁移存活,以及在脑部的归巢和疾病治疗的机制。本论文共分为三部分。第一部分:人羊膜间充质干细胞的体外分离培养;第二部分:第三代人羊膜间充质干细胞静脉移植在转基因阿尔茨海默症小鼠体内的迁移及存活;第三部分:第三代人羊膜间充质干细胞静脉移植在转基因阿尔茨海默症小鼠脑部的归巢以及疾病治疗机制研究。第一部分:从胎盘分离出人羊膜间充质干细胞,体外培养扩增,传至第三代,选择形态保持良好,生长旺盛的细胞做后续实验。第二部分:采用原代培养后传至第三代的人羊膜间充质干细胞进行转基因阿尔茨海默病小鼠的尾静脉移植,调整细胞浓度为1×106个/ml,注射量0.5 ml/只。采用组织冰冻切片,荧光显微镜观察人羊膜间充质干细胞移植后,不同时间点在转基因阿尔茨海默症小鼠体内心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及脑部的迁移情况。结果发现移植第三代的人羊膜间充质干细胞后,在不同的时间的小鼠的肝脏、脾脏、肺脏及脑组织都可以发现归巢的细胞存活;而任何时间在小鼠的心脏以及肾脏均未能检测到归巢细胞。并且所有实验小鼠生长良好,无明显的体重降低,及其他竖毛、抓狂、癫痫等不良反应。第三部分:第三代人羊膜干细胞静脉移植APP转基因鼠模型后31d,通过免疫组化技术,对第三代的人羊膜间充质干细胞在转基因阿尔茨海默病小鼠的脑组织中的分化功能进行研究,探讨可能的疾病治疗机制。结果发现小鼠脑组织中星形胶质细胞表达明显增多,神经干细胞、神经祖细胞以及神经元细胞也明显增加,并且没有致瘤现象,小鼠肝肾功能正常。表明人羊膜间充质干细胞尾静脉移植对治疗转基因阿尔茨海默病小鼠有积极的治疗效果,安全可行。本研究首次采用人羊膜间充质干细胞以静脉途径移植观察第三代人羊膜干细胞在阿尔茨海默氏症转基因鼠模型体内不同时间点的迁移情况,并研究人羊膜间充质干细胞移植31d后,在小鼠脑组织中的分化以及发挥的生物学功能。本研究结果将为今后的临床实验提供理论基础和直接证据。