TSLP对春季角结膜炎患者的免疫调节及其作用机制

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本论文分为两章。   第一章 TSLP对春季角结膜炎患者的免疫调节及其作用机制   目的: IgE介导Ⅰ型变态反应和T淋巴细胞介导的细胞免疫反应,被认为是过敏源刺激机体产生过敏性结膜炎的主要发病病理特征。然而,过敏性结膜炎的病因学及免疫发病机制尚未完全明了。近年来的研究表明,在过敏性疾病的初发过敏反应及其病变迁延过程中,胸腺基质淋巴细胞生成素(Thymic stromallymphopoietin,TSLP)都发生关键性作用。本研究拟从春季角结膜炎(vernalkeratoconjunctivitis,VKC)患者手术中获取巨大结膜乳头组织检测其是否表达TSLP,并进一步探索TSLP在VKC发病中的作用及其分子免疫机制。   方法:VKC病变组15份巨大结膜乳头标本,从8例12眼严重春季角结膜炎患者术中切除获取;对照组15份结膜组织标本,其中8份来自眼库,4份来自1例双眼结膜松弛症患者手术切除组织,3份来自翼状胬肉术中多余的结膜植片组织。两试验组,各取9份标本从蛋白水平用免疫组织化学染色检测TSLP、CD11c、OX40配体(OX40 ligand,OX40L)、OX40、CD4、白细胞介素(Interleukin,IL)-4、IL-5和IL-13的表达;取6份标本用于提取mRNA及定量实时PCR(quantitativereal-time polymerase chain reaction, real-time PCR)检测TSLP,OX40L,OX40,CD4,IL-4和IL-13基因表达水平。   结果:   1、免疫组织化学染色检测结果显示,所有的巨大结膜乳头组织上皮细胞及炎性浸润细胞均高度表达TSLP,而对照组结膜组织无表达。Real-time PCR分析也显示,TSLP mRNA基因高表达,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.001)。   2、分别用免疫组织化学染色检测结果显示,大量的CD11c+和OX40L+免疫活性细胞浸润于巨大结膜乳头组织中,而对照组结膜组织检查结果呈现阴性。   3、通过对CD4,OX40的免疫反应检测发现高表达OX40的CD4+Th2细胞在VKC结膜乳头组织浸润明显,Th2细胞因子(IL-4,IL-5和IL-13)在结膜乳头组织高表达,而对照组结膜组织检查结果呈现阴性。通过real-time PCR分析CD4,OX40L,OX40,IL-4和IL-13的基因表达水平,其结果与对照组比较,统计学差异有显著性意义(P<0.001)。   结论:本研究为上皮细胞因子TSLP在人类VKC发病和持续迁延的病程中,扮演了重要的启动因子角色提供了新的临床证据。研究结果证实了TSLP通过TSLP/OX40L/OX40信号通路,激活树突状细胞表达OX40L信号以促进CD4+T细胞向Th2细胞分化并释放细胞因子产生过敏性炎症反应,是人类VKC免疫病理发病机制之一。   第二章结膜乳头磨削术治疗重度VKC巨大结膜乳头的临床研究   目的:观察并评估结膜乳头磨削术治疗重度春季角结膜炎巨大结膜乳头的安全性和有效性。   方法:前瞻性、对照性临床病例研究。比较巨大结膜乳头磨削术(8例12眼)与结膜乳头切除术(9例12眼)两种方法治疗巨大结膜乳头,手术前后的症状、体征的变化情况。   结果:两组病例术后1周、2周、4周不适症状、体征明显改改善,与术前相比统计学差异有显著性意义(p<0.01)。但在术后1~4周巨大结膜乳头体征评分、术后2周角膜损伤修复情况等指标,磨削治疗组治疗效果优于手术切除组(p<0.05)。   结论:结膜乳头磨削术是治疗重度春季角结膜炎巨大结膜乳头的简单、安全、有效的治疗方式,该技术可使粗糙的结膜创面快速变平,减轻患者不适症状,促进损伤的角结膜上皮修复,可作为临床手术治疗严重巨大结膜乳头病变的选择方式。  
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