神农香菊多倍体的诱导及与露地菊‘纽9717’种间杂交研究

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神农香菊(Dendranthema indicum var.aromaticum)是菊属植物中罕见的具有浓郁香味的种,其花、叶及根均具有浓郁的香气,这对菊属植物的品种改良具有重要的意义。本文主要研究秋水仙素种子浸泡法、茎尖棉球滴定法对神农香菊多倍体的诱导效果;多倍体植株在外部形态、细胞学和染色体数目方面的变异情况;四倍体神农香菊和露地菊‘纽9717’的花部特征观察,利用离体萌发法、联苯胺-过氧化氢法找出它们花粉活力最高时间、柱头可授性最强时间,判断二者杂交指数及不同杂交方式下结实情况,为后期进行神农香菊和露地菊杂交试验奠定理论基础。主要研究成果如下:秋水仙素溶液浸泡神农香菊预萌动和露白种子诱导多倍体时,露白种子的诱变率稍高于预萌动种子,以1000mg/L秋水仙素溶液浸泡露白种子24h时,诱变率最高为14.50%。秋水仙素溶液棉球滴定神农香菊茎尖诱导多倍体时,以1000mg/L秋水仙素溶液连续滴定神农香菊茎尖7d时,诱变率最高为40.00%。从外部形态看,多倍体植株的叶片颜色较二倍体植株颜色深且绿,叶片相对更厚重,表皮毛增多,花朵直径明显增大;从细胞学角度看,多倍体神农香菊下表皮气孔明显大于二倍体,气孔密度明显小于二倍体植株,且多倍体植株气孔中的叶绿体数目明显比二倍体中的多;从染色体数目上看,二倍体植株的染色体数目为2n=2x=18,四倍体植株的染色体数目为2n=4x=36。最终共获得嵌合体植株301株,四倍体植株7株。经过对染色体数目鉴定法中各个步骤的探索得知,神农香菊根尖压片最适合的条件为:先用0.002M 8-羟基喹啉在4℃冰箱中预处理7h,再用固定液(无水乙醇:冰醋酸=3:1)在4℃冰箱中固定24h,弃去固定液,蒸馏水冲洗2-3次,再用lmol/L HCL在60℃水浴锅中解离8min,弃去解离液,蒸馏水冲洗2-3次,最适合的染色剂是卡宝品红,染色时间是30min。四倍体神农香菊和露地菊‘纽9717’花粉最适萌发培养基均为ME3+150g/L PEG 4000+150g/L蔗糖+0.1g/L硼酸+ 0.1g/L Ca2+。四倍体神农香菊在开花第4d时花粉萌发率最高为64.63%,在13:00时取材花粉萌发率最高为54.56%,在开花第9d,13:00~14:00时柱头可授性最强;露地菊‘纽9717’在开花第6d时花粉萌发率最高为11.63%,在13:00取材时花粉萌发率最高为9.26%,在开花4-5d,12:00~13:00时柱头可授性最强。四倍体神农香菊和露地菊‘纽9717’的繁育系统均为异交(部分自交不孕),需要传粉者。套袋试验结果显示四倍体神农香菊在去雄,套袋,人工异花授粉条件下结实率提高为79.28%,其它条件下结实率为40%左右,其中在去雄,套袋,不授粉条件下不结实。
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